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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】片段连接的问题
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wbfree

铜虫 (初入文坛)

[交流] 【求助/交流】片段连接的问题 已有3人参与

我要克隆的DNA片段大小为4500bp，宝生物的pMD18-T、19-T、20-T载体都用过，就是连接不上，请问需要怎么改变实验条件，你们都是用的哪些载体？ 谢谢
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1楼 2010-05-14 08:09:00
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liyong1981

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
帮你顶下，片段连T有点大
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2楼2010-05-14 08:29:38
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
4.5k连T载体会很困难的啵，你尝试4度连24h吧
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3楼2010-05-14 10:18:53
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jasco

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2010-05-14 10:18:53:
4.5k连T载体会很困难的啵，你尝试4度连24h吧

同时在连接12h左右添加点atp


或者用invitrogen的topo载体试试
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4楼2010-05-14 10:21:03
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