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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】基因重组中的连接问题
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pilicaizi

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】基因重组中的连接问题 已有5人参与

如果在目的基因片段内部含有所选酶的酶切位点，那么该如何利用此酶切割将目的基因连到载体上？
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愿得一人心，白首不相离
1楼 2010-11-19 09:23:26
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼
换一个酶，这个在加酶切位点的时候，不是应该避免这个问题吗？
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严于律己，宽以待人
2楼2010-11-19 09:29:04
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼
换一个酶，这个在加酶切位点的时候，不是应该避免这个问题吗？
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严于律己，宽以待人
3楼2010-11-19 09:29:25
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)
你这么一切， 目的片段就断了。    做步移的时候才用这个方法。

   仅解答你问题： 载体也酶切。
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4楼2010-11-19 10:21:36
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yyazmzr

银虫 (小有名气)
★
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不好吧，这样的话，目的基因也就切碎了。个人建议你在PCR的引物设计时，前面重新加个基因中间没有的酶切点，而载体上面对应又有合适的。
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5楼2012-08-14 18:52:42
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woshizhufeng

新虫 (小有名气)
★
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建议更换酶切位点，你这一切目的片段就断了。
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6楼2012-08-15 09:13:06
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王礼鹏

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
在PCR引物设计时在5‘端加入一个酶切位点，而这个酶切位点在目的片段中没有，而在载体中有。。。。
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7楼2012-08-15 10:35:21
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