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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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pilicaizi

木虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】基因重组中的连接问题 已有5人参与

如果在目的基因片段内部含有所选酶的酶切位点,那么该如何利用此酶切割将目的基因连到载体上?
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼

换一个酶,这个在加酶切位点的时候,不是应该避免这个问题吗?
严于律己,宽以待人
2楼2010-11-19 09:29:04
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最爱花诗雨

金虫 (正式写手)

穷鬼

换一个酶,这个在加酶切位点的时候,不是应该避免这个问题吗?
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3楼2010-11-19 09:29:25
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yixuanwin

铁杆木虫 (正式写手)

你这么一切, 目的片段就断了。    做步移的时候才用这个方法。

   仅解答你问题: 载体也酶切。
4楼2010-11-19 10:21:36
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yyazmzr

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不好吧,这样的话,目的基因也就切碎了。个人建议你在PCR的引物设计时,前面重新加个基因中间没有的酶切点,而载体上面对应又有合适的。
5楼2012-08-14 18:52:42
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woshizhufeng

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
建议更换酶切位点,你这一切目的片段就断了。
6楼2012-08-15 09:13:06
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王礼鹏

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
在PCR引物设计时在5‘端加入一个酶切位点,而这个酶切位点在目的片段中没有,而在载体中有。。。。
7楼2012-08-15 10:35:21
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