24小时热门版块排行榜

返回列表

yuliansheng

金虫 (小有名气)

MolEPI: 9
应助: 4 (幼儿园)
贵宾: 0.005
金币: 454.9
散金: 100
红花: 3
帖子: 94
在线: 27.8小时
虫号: 1261888
注册: 2011-04-11
性别: GG
专业: 膜生物化学与膜生物物理学

[求助] 咨询个基因重组实验中问题

各位高手们，
咨询大家个问题，基因重组实验中有一步是给切好的质粒载体用碱性磷酸酶去磷酸化，之后再用连接酶连接目的基因片段和质粒载体。请问，这步中如果把去磷酸化的质粒载体再用连接酶连接，是否可以在连接上？如果不可以，那为什么能把质粒载体和目的基因片段连接上？

[ Last edited by yuliansheng on 2011-4-27 at 12:46 ]

回复此楼

» 猜你喜欢

宠物寄生虫防治：氟雷拉纳阻断GABA受体，持效12周驱杀跳蚤蜱虫已经有0人回复
为呼吸打开通道：依伐卡托的科学之旅已经有1人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有181人回复
Dordaviprone（ONC201）：小分子药物在中线胶质瘤中的应用已经有0人回复
依喜替康：新型喜树碱衍生物的研究进展已经有1人回复
膀胱癌靶向治疗新选择：厄达替尼作用机制与耐药研究进展已经有0人回复
从水母到实验室：腔肠素的发现历程与生物发光奥秘已经有1人回复
线粒体氧化磷酸化的新靶点：S-Gboxin的发现与研究进展已经有0人回复
PROTAC药物开发选择VHL配体：MDK-7526以87%出口向量占有率成首选已经有0人回复
MCC950：NLRP3炎症小体特异性抑制剂的科研应用与前景已经有0人回复
康替唑胺研发17年：如何解决多重耐药菌感染难题已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

学习....

1楼 2011-04-27 12:44:50

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

xuguanghai

木虫 (职业作家)

MolEPI: 1
应助: 17 (小学生)
金币: 2841.2
散金: 2764
红花: 16
沙发: 42
帖子: 3072
在线: 296.7小时
虫号: 449061
注册: 2007-11-02
性别: GG
专业: 有机合成

【答案】应助回帖

★ ★ ★
yuliansheng(金币+1): 说的太好、太详细了，谢谢，真的很感谢！ 2011-04-27 20:48:46
西瓜(金币+3): Good!可惜不是原创，离EPI差一点。 2011-04-27 21:35:45

常常使用碱性磷酸酶去除5’磷酸基团以抑制载体DNA的自身环化。利用T4 DNA连接酶进行目的DNA片段和载体的体外连接反应，也就是在双链DNA 5’磷酸和相邻的3’羟基之间形成新的共价键。如载体的两条链都带有5’磷酸（未脱磷），可形成4个新的磷酸二酯键；如载体DNA已脱磷，则只能形成2个新的磷酸二酯键，此时产生的重组DNA带有两个单链缺口，在导入感受态细胞后可被修复。

赞一下(1人)

回复此楼

2楼2011-04-27 13:51:25

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yuliansheng

金虫 (小有名气)

MolEPI: 9
应助: 4 (幼儿园)
贵宾: 0.005
金币: 454.9
散金: 100
红花: 3
帖子: 94
在线: 27.8小时
虫号: 1261888
注册: 2011-04-11
性别: GG
专业: 膜生物化学与膜生物物理学

引用回帖:

Originally posted by xuguanghai at 2011-04-27 13:51:25:
常常使用碱性磷酸酶去除5’磷酸基团以抑制载体DNA的自身环化。利用T4 DNA连接酶进行目的DNA片段和载体的体外连接反应，也就是在双链DNA 5’磷酸和相邻的3’羟基之间形成新的共价键。如载体的两条链都带有5’磷酸（ ...

高手啊！