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lovejesus

银虫 (小有名气)

[交流] 目的基因导入到受体细胞会发生基因重组吗?说说原因! 已有4人参与

请教 如题 谢谢各位了
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瓶儿花

金虫 (小有名气)

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wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-09-07 17:40:47
这样看你的载体是什么样的载体了。如果是整合型质粒的话,就会把整个质粒一起整合到基因组上了,如果是温敏型质粒,就能在高温的情况下,迫使载体上的目的基因与基因发生交换,从而达到破坏基因的目的,基因敲除就是利用这个原理才操作的。如果仅仅是克隆载体的话,对基因组一点影响都没有。
2楼2011-09-07 17:31:13
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lovejesus

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 瓶儿花 at 2011-09-07 17:31:13:
这样看你的载体是什么样的载体了。如果是整合型质粒的话,就会把整个质粒一起整合到基因组上了,如果是温敏型质粒,就能在高温的情况下,迫使载体上的目的基因与基因发生交换,从而达到破坏基因的目的,基因敲除就 ...

多谢瓶儿花 详细解答 刚刚学习 不怎么理解 那是不是说 目的基因的提取和基因重组过程在某种程度上说 是一样的呢
3楼2011-09-08 11:55:18
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瓶儿花

金虫 (小有名气)

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dhd997(金币+2): 不错 2011-09-08 18:27:37
不是的,目的基因的提取是用通过PCR或其他方法来进行克隆的,基因重组过程是自身发生的,不是人为的。
4楼2011-09-08 14:00:00
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silicare

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wanhscn(MolEPI+1): 2011-09-08 16:40:36
可以重组到基因组,现在最常用的有2种方法

1,同源重组,这就是knockout最常用的方法,比如red重组系统,这需要你在构建载体的时候用PCR等方法得到和目的区域相同的片段,在重组酶的帮助下,把你的目的片段特异的整合到你想要的地方,达到敲除或敲入的目的

2,随机整合,这是转染常用的方法,普通质粒会有一定的概率随机插入到你的基因组,位置未知,概率很低,一般需要一个标记基因做筛选,比如g418,嘌呤霉素等等,这个是不受质粒序列影响的,成功率低,所以筛选很困难
5楼2011-09-08 16:23:47
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刘玉佩

金虫 (小有名气)


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自发的重组概率很低,现在吉锐生物的IOS技术可以将目的基因准确的整合到确定的靶点上
6楼2012-07-18 10:27:10
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wuwenhao114

铁虫 (初入文坛)


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引用回帖:
1181044楼: Originally posted by 瓶儿花 at 2011-09-07 17:31:13
这样看你的载体是什么样的载体了。如果是整合型质粒的话,就会把整个质粒一起整合到基因组上了,如果是温敏型质粒,就能在高温的情况下,迫使载体上的目的基因与基因发生交换,从而达到破坏基因的目的,基因敲除就是 ...

你好,如果不是温敏性载体是不是就不能达到基因重组或基因敲除的目的?
7楼2012-09-04 10:37:27
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