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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 目的基因导入到受体细胞会发生基因重组吗？说说原因！
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lovejesus

银虫 (小有名气)

[交流] 目的基因导入到受体细胞会发生基因重组吗？说说原因！ 已有4人参与

请教 如题 谢谢各位了
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1楼 2011-09-07 15:45:16
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silicare

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wanhscn(MolEPI+1): 2011-09-08 16:40:36
可以重组到基因组，现在最常用的有2种方法

1，同源重组，这就是knockout最常用的方法，比如red重组系统，这需要你在构建载体的时候用PCR等方法得到和目的区域相同的片段，在重组酶的帮助下，把你的目的片段特异的整合到你想要的地方，达到敲除或敲入的目的

2，随机整合，这是转染常用的方法，普通质粒会有一定的概率随机插入到你的基因组，位置未知，概率很低，一般需要一个标记基因做筛选，比如g418，嘌呤霉素等等，这个是不受质粒序列影响的，成功率低，所以筛选很困难
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5楼2011-09-08 16:23:47
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瓶儿花

金虫 (小有名气)
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wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-09-07 17:40:47
这样看你的载体是什么样的载体了。如果是整合型质粒的话，就会把整个质粒一起整合到基因组上了，如果是温敏型质粒，就能在高温的情况下，迫使载体上的目的基因与基因发生交换，从而达到破坏基因的目的，基因敲除就是利用这个原理才操作的。如果仅仅是克隆载体的话，对基因组一点影响都没有。
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2楼2011-09-07 17:31:13
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lovejesus

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 瓶儿花 at 2011-09-07 17:31:13:
这样看你的载体是什么样的载体了。如果是整合型质粒的话，就会把整个质粒一起整合到基因组上了，如果是温敏型质粒，就能在高温的情况下，迫使载体上的目的基因与基因发生交换，从而达到破坏基因的目的，基因敲除就 ...

多谢瓶儿花 详细解答 刚刚学习 不怎么理解 那是不是说 目的基因的提取和基因重组过程在某种程度上说 是一样的呢
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3楼2011-09-08 11:55:18
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瓶儿花

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 不错 2011-09-08 18:27:37
不是的，目的基因的提取是用通过PCR或其他方法来进行克隆的，基因重组过程是自身发生的，不是人为的。
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4楼2011-09-08 14:00:00
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