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yuliansheng

金虫 (小有名气)

[求助] 咨询个基因重组实验中问题

各位高手们,
                 咨询大家个问题,基因重组实验中有一步是给切好的质粒载体用碱性磷酸酶去磷酸化,之后再用连接酶连接目的基因片段和质粒载体。请问,这步中如果把去磷酸化的质粒载体再用连接酶连接,是否可以在连接上?如果不可以,那为什么能把质粒载体和目的基因片段连接上?

[ Last edited by yuliansheng on 2011-4-27 at 12:46 ]
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hkfgwww

银虫 (正式写手)

★ ★ ★
dhd997(金币+3): good 2011-05-19 12:45:14
去磷酸化时有一个问题,好像5‘端突出和3’端突出需要不同的处理手段。
但是,
酶切后5‘端突出和3’端突出分别是什么意思啊?
例如EcoR I,识别位点为
G'AATTC
CAATT'G
微生物发酵
4楼2011-05-19 09:15:09
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