| 查看: 2134 | 回复: 10 | ||||
sdluqun铁杆木虫 (著名写手)
板砖队长
|
[交流]
【求助/交流】求助TA克隆问题 已有9人参与
|
|
前天做的目的片段PCR并且胶回收，经琼脂糖检测，4微升上样量，条带亮度大约D2000 Marker 中的750条带的两倍，即含量约为300ng/ul。当天晚上做上连接，用的是promega的T载体：5ul 2*buffer; 1ul T4连接酶; 1ul（50ng/ul） pGEM-T easy 载体; 3/2/1ul 回收的目的片段; ddH2O补齐至10ul体系。 前天晚上接菌DH5α，昨天早上转接，之后氯化钙法制备了感受态，放置4小时，转化，摇菌，涂板。平板翻过来的时间为20：30，今天早上来实验室看看，阳性对照和样品都是一片空白，郁闷， 恳求高手指点！！！ PS：我的目的基因在1400bp左右，是不是片段偏大不好连呢？ [ Last edited by sdluqun on 2010-6-10 at 19:44 ] |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 科研 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有117人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- TA克隆遇到的问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】单克隆摇菌16小时后LB液体培养基还没有变混浊求原因
已经有23人回复
- 【求助/交流】急！克隆快做了一个月了，就是做不出来
已经有24人回复
- 【求助/交流】TA克隆
已经有15人回复
- 【求助/交流】克隆Amp/Kan选择以及蓝白筛选
已经有10人回复
- 【求助/交流】TA克隆为什么会长出蓝斑
已经有4人回复
- 【求助/交流】目的基因克隆总不成功
已经有5人回复
- 【求助/交流】有关分子克隆发生突变的疑惑
已经有9人回复
- 【求助/交流】克隆测序无信号
已经有14人回复
silicare
荣誉版主 (文坛精英)
合伙创业版兼职版主
- MolEPI: 1
- 应助: 88 (初中生)
- 贵宾: 29.823
- 金币: 18946.3
- 散金: 24272
- 红花: 300
- 沙发: 88
- 帖子: 10222
- 在线: 1602.6小时
- 虫号: 948825
- 注册: 2010-01-26
- 专业: 摩尼教
- 管辖: 新药研发
2楼2010-06-09 11:19:46
liyong1981 
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 774.1
- 散金: 116
- 帖子: 905
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 357405
- 注册: 2007-04-27
- 性别: GG
- 专业: antibody
3楼2010-06-09 11:42:12
ben1147
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 18 (小学生)
- 贵宾: 0.003
- 金币: 5847.6
- 红花: 6
- 帖子: 952
- 在线: 116.9小时
- 虫号: 709538
- 注册: 2009-02-26
- 专业: 微生物生理与生物化学
4楼2010-06-09 11:50:27
fywjp
木虫 (正式写手)
- 应助: 3 (幼儿园)
- 金币: 6334.5
- 红花: 1
- 帖子: 664
- 在线: 111小时
- 虫号: 825701
- 注册: 2009-08-10
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
5楼2010-06-09 12:05:10
墨香若水
木虫 (著名写手)
小小囧虫
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 3059.1
- 散金: 942
- 红花: 10
- 沙发: 1
- 帖子: 1408
- 在线: 255.2小时
- 虫号: 528502
- 注册: 2008-03-19
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
6楼2010-06-09 12:25:21
悬崖上的牛仔
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 191.8
- 散金: 50
- 帖子: 239
- 在线: 15.2小时
- 虫号: 449007
- 注册: 2007-11-02
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
7楼2010-06-09 12:59:10
bujunyang
木虫 (正式写手)
卓尔不群
- 应助: 15 (小学生)
- 金币: 2600.8
- 散金: 299
- 红花: 4
- 帖子: 829
- 在线: 205.8小时
- 虫号: 808463
- 注册: 2009-07-13
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
8楼2010-06-09 13:05:12
ben1147
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 18 (小学生)
- 贵宾: 0.003
- 金币: 5847.6
- 红花: 6
- 帖子: 952
- 在线: 116.9小时
- 虫号: 709538
- 注册: 2009-02-26
- 专业: 微生物生理与生物化学
9楼2010-06-09 15:53:43
zhangjh069975
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 278.4
- 帖子: 25
- 在线: 3.8小时
- 虫号: 828896
- 注册: 2009-08-16
- 性别: MM
- 专业: 生命科学
10楼2010-06-09 19:35:15
20