| 查看: 3033 | 回复: 17 | |||
[交流]
RT-PCR后的cDNA呢？ 已有5人参与
|
|
今天做真菌RT-PCR合成cDNA第一链，但是却出现下图结果，我的目的RNA应是1000多bp，请做过的虫子帮忙分析下原因。marker是DL2000，最右面是RNA，中间两道分别是用oligo（dT）和随机引物作引物的结果。 [ Last edited by amisking on 2010-5-10 at 18:18 ] |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有119人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- cDNA验证，PCR不出目的条带的原因
已经有5人回复
- 基因组PCR用于验证RT-PCR引物的实验思路，请大虾们把把关
已经有21人回复
- cDNA如何扩增？
已经有13人回复
- 反转录的cDNA没问题，但是实时定量PCR却不行。内参扩不出来啊。
已经有8人回复
- 请问pcr产物约为450bp的大小，可以用来做 real time RT-PCR吗？
已经有9人回复
- 实时定量PCR的模板是mRNA还是cDNA好？
已经有6人回复
- 已有cDNA库为什么用RT-PCR制备northern杂交探针？
已经有4人回复
- RNA反转录合成cDNA第一链后是以什么状态存在的？
已经有6人回复
- 已知一个基因的DNA序列，怎么得到它的cDNA序列，我想做RT-PCR
已经有6人回复
- 选购什么样的RT-PCR试剂盒
已经有6人回复
- cDNA凝胶电泳结果分析
已经有14人回复
- 请问，用基因组DNA和cDNA做模板进行PCR有什么区别呀？
已经有6人回复
- 有关RT-PCR模板RNA量的问题，请高手解答！！！
已经有16人回复
- RT-PCR的cDNA不能扩增出目的条带，只有内参基因能扩增出来
已经有14人回复
- PCR：关于EB的问题！
已经有15人回复
- cDNA稀释10倍会出现结果逆转吗？？？？？？
已经有4人回复
- 反转录获得cDNA后，为什么还要做RT-PCR?
已经有4人回复
- cDNA做普通PCR扩不出条带来
已经有13人回复
- PCR引物是DNA还是RNA呢？
已经有13人回复
- 想问下在以cDNA为模板时，PCR的结果却是徒步 什么原因
已经有5人回复
- 【求助/交流】RT-PCR的数据处理
已经有14人回复
- 【求助/交流】PCR出现SMEAR
已经有9人回复
- 【求助/交流】逆转录第一链cDNA是否成功了，帮忙看一下
已经有5人回复
- 【求助/交流】以cDNA为模板PCR扩增目的片段时条带较浅原因
已经有13人回复
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
2楼2009-08-11 21:37:31
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
3楼2009-08-11 22:14:15
pigsunny
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 46
- 帖子: 159
- 在线: 10.3小时
- 虫号: 773572
- 注册: 2009-05-18
- 性别: GG
- 专业: 动物营养与饲料科学专业
4楼2009-08-11 23:21:33
michaelwuqingyu
金虫 (正式写手)
- 应助: 9 (幼儿园)
- 金币: 750.1
- 散金: 550
- 红花: 1
- 帖子: 897
- 在线: 49.5小时
- 虫号: 256489
- 注册: 2006-06-03
- 专业: 植物生理与生化
5楼2009-08-11 23:35:25
三磷酸腺苷
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 7
- 应助: 1 (幼儿园)
- 贵宾: 0.021
- 金币: 7298.5
- 散金: 9
- 红花: 13
- 帖子: 4032
- 在线: 224.7小时
- 虫号: 551611
- 注册: 2008-04-27
- 性别: GG
- 专业: 神经系统肿瘤（含特殊感受
6楼2009-08-11 23:38:23
帮顶 7楼2009-08-12 00:42:38
wangqk198738
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1079.6
- 红花: 2
- 帖子: 420
- 在线: 19.8小时
- 虫号: 531615
- 注册: 2008-03-23
- 专业: 生物化学与分子生物学
8楼2009-08-12 07:58:09
★ ★ ★ ★
tingl0087(金币+2,VIP+0):谢谢！ 8-12 23:25
tingl0087(金币+2,VIP+0):今天直接RT后做了PCR，可是只有引物二聚体，照你的经验，可能是什么原因呢？再谢谢了！ 8-12 23:32
tingl0087(金币+2,VIP+0):谢谢！ 8-12 23:25
tingl0087(金币+2,VIP+0):今天直接RT后做了PCR，可是只有引物二聚体，照你的经验，可能是什么原因呢？再谢谢了！ 8-12 23:32
|
真菌这类真核生物，如果用Trizol提RNA，本来就应该有3条带吧，5.8S， 18 S， 28 S RNA，没有错。 cDNA基本上电泳看不出条带的，就是smear，楼主不用电泳了，直接逆转录，没有问题。cDNA的量本来就少，加上是单链，看不出自己目的条带的。18S，28S RNA 能看到，是因为它的浓度非常大，有比较均一，一样的大小。 |
9楼2009-08-12 11:19:19
10楼2009-08-12 14:51:01
