应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RT-PCR后的cDNA呢？
182/2返回列表上一页12
查看: 3022  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

shuaiger

木虫 (正式写手)
楼主只是RT，还没有PCR呢！
赞一下 回复此楼
11楼2009-08-12 17:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

guyue2885

银虫 (正式写手)
正常~~~~ＨＨ
回复此楼
12楼2009-08-12 18:30:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
tingl0087(金币+1,VIP+0):是自己设计的引物 8-13 10:40
引用回帖:
Originally posted by panacea007 at 2009-8-12 11:19:



真菌这类真核生物，如果用Trizol提RNA，本来就应该有3条带吧，5.8S， 18 S， 28 S RNA，没有错。

cDNA基本上电泳看不出条带的，就是smear，楼主不用电泳了，直接逆转录，没有问题。cDNA的量本来就少，加 ...

1。首先用别人用过没问题的引物来确定是反转录问题还是PCR的问题。我看你的RNA提取质量不错，反转录如果按照protocol来成功率也很高，很有可能是你的引物有问题，你是用内参p的么？
赞一下(1人) 回复此楼
13楼2009-08-13 03:15:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mxb2008

木虫 (著名写手)

我说两句

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
我认为总RNA还算可以，可以做反转录。我也在做这方面的实验，反转录条带也可以。可做下游实验。关于总RNA我说两句，得到什么样的条带，是两条，还是三条，主要看你沉淀RNA是用的是什么样的沉淀剂，用LiCl得到的就是两条，第三条很淡，有时还看不到，如你用乙醇或异丙醇做沉淀剂得到是三条，第三条还很亮。根据以上分析，我基本可以肯定作者用的乙醇或异丙醇来沉淀的总RNA。
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2010-05-10 13:41:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仕博

金虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by 三磷酸腺苷 at 2009-08-11 22:14:15:
这种情况才是正常的~~~
我现在都不跑cDNA电泳，逆转录之后直接PCR

现在的高手怎么越来越厉害？
不跑电泳咋能知道自己的DNA质量是不是好呢，万一DNA不行，那后面的实验不是都白做了吗？
快告诉我下是咋个事情法，我以后也就不跑了，呵呵~
赞一下(1人) 回复此楼
生命在于折腾~
15楼2010-05-10 14:01:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jasco

木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by panacea007 at 2009-08-12 11:19:19:



真菌这类真核生物，如果用Trizol提RNA，本来就应该有3条带吧，5.8S， 18 S， 28 S RNA，没有错。

cDNA基本上电泳看不出条带的，就是smear，楼主不用电泳了，直接逆转录，没有问题。cDNA的量本来就少，加 ...

正解，三条带是正常滴，电泳是不需要滴，
赞一下(1人) 回复此楼
16楼2010-05-10 15:13:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

虫子火箭兵

金虫 (正式写手)
正常，因为mRNA的大小就不一样，所以反转录后的cDNA也应该是弥散的
赞一下 回复此楼
17楼2010-05-10 18:11:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

六妖妖

金虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
反转cDNA的质量要在RNA水平上去控制。总RNA完整性好，抽提的量足够大，反转出的cDNA基本没问题。除非是反转录试剂不行。
赞一下 回复此楼
18楼2012-02-15 14:03:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tingl0087 的主题更新
182/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +11 家与远方 2026-08-10 16/800 2026-08-16 10:28 by ray43
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +31 医学老男孩 2026-08-13 70/3500 2026-08-16 08:29 by 医学老男孩
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +12 archvillain 2026-08-15 23/1150 2026-08-15 20:47 by foyo404
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的，真有人买论文么？感觉没必要啊 +12 Tide man 2026-08-10 13/650 2026-08-15 16:34 by 氺木
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +7 Ldrop2023 2026-08-13 7/350 2026-08-15 15:57 by mzhh2000
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果？ +4 yuleib84 2026-08-11 4/200 2026-08-14 23:05 by lfy8008
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 结合人工智能，周易传统文化，filecode打分制来了，3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭