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tingl0087

金虫 (小有名气)

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专业: 微生物生理与生物化学

[交流] RT-PCR后的cDNA呢？已有5人参与

今天做真菌RT-PCR合成cDNA第一链，但是却出现下图结果，我的目的RNA应是1000多bp，请做过的虫子帮忙分析下原因。marker是DL2000，最右面是RNA，中间两道分别是用oligo（dT）和随机引物作引物的结果。

[ Last edited by amisking on 2010-5-10 at 18:18 ]

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1楼 2009-08-11 21:02:59

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mxb2008

木虫 (著名写手)

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专业: 植物遗传学

我说两句

★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流

我认为总RNA还算可以，可以做反转录。我也在做这方面的实验，反转录条带也可以。可做下游实验。关于总RNA我说两句，得到什么样的条带，是两条，还是三条，主要看你沉淀RNA是用的是什么样的沉淀剂，用LiCl得到的就是两条，第三条很淡，有时还看不到，如你用乙醇或异丙醇做沉淀剂得到是三条，第三条还很亮。根据以上分析，我基本可以肯定作者用的乙醇或异丙醇来沉淀的总RNA。