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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RT-PCR后的cDNA呢？
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tingl0087

金虫 (小有名气)

[交流] RT-PCR后的cDNA呢？ 已有5人参与

今天做真菌RT-PCR合成cDNA第一链，但是却出现下图结果，我的目的RNA应是1000多bp，请做过的虫子帮忙分析下原因。marker是DL2000，最右面是RNA，中间两道分别是用oligo（dT）和随机引物作引物的结果。

[ Last edited by amisking on 2010-5-10 at 18:18 ]
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1楼 2009-08-11 21:02:59
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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)
★
tingl0087(金币+1,VIP+0):谢谢！恍然大悟~ 8-12 23:19
这样跑胶没有意义，你看到的其实是降解的RNA， EB只能和双链DNA结合，不能和单链cDNA结合。就算结合你也看不到条带，cDNA的大小不等，你想看到多大的呢？
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5楼2009-08-11 23:35:25
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
★
tingl0087(金币+1,VIP+0):那这种情况我应该继续往下做吗？ 8-11 22:09
总cDNA本来就是一片smear的……
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2楼2009-08-11 21:37:31
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)
这种情况才是正常的~~~
我现在都不跑cDNA电泳，逆转录之后直接PCR
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3楼2009-08-11 22:14:15
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pigsunny

铜虫 (小有名气)
我都不跑cDNA电泳，逆转录之后直接PCR
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学习成就未来！
4楼2009-08-11 23:21:33
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