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双酶切为什么会切出来这么多条带？已有3人参与
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我是对质粒进行双酶切，用的是BamH I 和EcoR V这两个酶，采用20微升酶切体系。Marker 是15000的，四个样的双酶切目的条带在1650bp左右的位置，最右侧的一个是对照，对照质粒酶切下来的条带是400bp左右。为什么我得到的重组质粒双酶切会出现这么多条带的情况？该如何避免？单酶切一切正常。第二个图是单酶切。 双酶切1o 2016-03-10 21 时 05 分.jpg  EcoRV单酶切条带 5号112016-03-10 18 时 46 分.jpg |
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陈硕5楼2016-03-11 08:56:51
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我们实验室自己重建的质粒。感觉我后期再加工加工可以做marker当商品卖了，到时候给你五折优惠，哈哈。我也不知道为啥，出发质粒好好的，要说双酶切咋会这么多长度区间都有条带呢？想不通，找不到原因。 发自小木虫Android客户端 |
10楼2016-03-11 17:56:28
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会不会和你抽的质粒有关系啊，我们实验室之前就有同学抽质粒出现问题，双酶切时就出现好几条杂条带。后来重新抽了质粒再去双酶切就好了。 发自小木虫Android客户端 |
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14楼2016-03-12 00:22:54
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如果担心你的酶切位点有问题，你可以在质粒那个酶切位点设计一个引物，将质粒拿去用引物测个序，就知道位点有没有问题了 发自小木虫Android客户端 |
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17楼2016-03-12 15:31:31
18楼2016-03-13 11:17:25
2楼2016-03-10 22:06:17
3楼2016-03-10 22:28:27
wang2568
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4楼2016-03-11 08:44:35
ken19860823
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6楼2016-03-11 09:28:57
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也是用这两个酶。好纠结啊，BamH I之前酶切不成功，感觉像是这个酶切位点出了问题。让我不明白的是就算那个位点出问题，那该怎么解释双酶切时出来这么多条带。这两天快被整疯了，想不明白。 发自小木虫Android客户端 |
7楼2016-03-11 14:53:17
8楼2016-03-11 14:54:28
ken19860823
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9楼2016-03-11 15:45:45