24小时热门版块排行榜    

查看: 6195  |  回复: 34

陈硕

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by ken19860823 at 2016-03-11 15:45:45
大兄弟,你没发现EcoRV是平末端酶么?换一个其他的酶吧。...

实验室之前的师姐使用的,后续师兄使用也没啥问题,你看对照都好好的。到我这儿就有问题。

发自小木虫Android客户端
11楼2016-03-11 17:57:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈硕

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by anjingde at 2016-03-11 08:56:51
BamH I 和EcoR V这两个酶的单酶切都是要做的,如果两个结果相差很大,可能是载体或者重组的基因里有其中一个酶的酶切位点

这个是BamH I 的单酶切结果,问题应该出现在这个地方。但是不明白就算是这个位点出了问题,那也不至于形成这么多条带啊····重组质粒以前没出现过这问题。
双酶切为什么会切出来这么多条带?
BamhI单酶切12016-03-11 21 时 14 分.jpg

12楼2016-03-11 21:31:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

森林独行者

新虫 (初入文坛)

你先做个但酶切
13楼2016-03-12 00:02:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寻塔dadada

新虫 (初入文坛)

会不会和你抽的质粒有关系啊,我们实验室之前就有同学抽质粒出现问题,双酶切时就出现好几条杂条带。后来重新抽了质粒再去双酶切就好了。

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

14楼2016-03-12 00:22:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈硕

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
13楼: Originally posted by 森林独行者 at 2016-03-12 00:02:45
你先做个但酶切

做过了,第二个图和第三个图就是单酶切。

发自小木虫Android客户端
15楼2016-03-12 13:07:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈硕

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by 寻塔dadada at 2016-03-12 00:22:54
会不会和你抽的质粒有关系啊,我们实验室之前就有同学抽质粒出现问题,双酶切时就出现好几条杂条带。后来重新抽了质粒再去双酶切就好了。

嗯嗯,我再试试。

发自小木虫Android客户端
16楼2016-03-12 13:07:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gmingwei102

新虫 (初入文坛)

如果担心你的酶切位点有问题,你可以在质粒那个酶切位点设计一个引物,将质粒拿去用引物测个序,就知道位点有没有问题了

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

17楼2016-03-12 15:31:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hawkinghj

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
陈硕: 金币+5 2016-03-14 10:37:15
把空质粒和目标基因分别进行单酶切,逐步排除问题嘛!
这么多条带你不会是把marker,和buffer弄混了吧?

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

18楼2016-03-13 11:17:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈硕

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
18楼: Originally posted by hawkinghj at 2016-03-13 11:17:25
把空质粒和目标基因分别进行单酶切,逐步排除问题嘛!
这么多条带你不会是把marker,和buffer弄混了吧?

问题应该是出在BamH I这个酶切位点上。我做这么多实验了咋可能弄混buffer呢,哈哈。

发自小木虫Android客户端
19楼2016-03-14 01:33:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

陈硕

铜虫 (正式写手)

送红花一朵
引用回帖:
17楼: Originally posted by gmingwei102 at 2016-03-12 15:31:31
如果担心你的酶切位点有问题,你可以在质粒那个酶切位点设计一个引物,将质粒拿去用引物测个序,就知道位点有没有问题了

通过几次酶切验证大致确定是哪里的问题了,谢谢啦!没法送金币,我就送红花
20楼2016-03-14 10:30:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 陈硕 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研化学308分求调剂 +8 你好明天你好 2026-03-23 9/450 2026-03-25 09:13 by aa331100
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 085600材料与化工调剂 +8 A-哆啦Z梦 2026-03-23 13/650 2026-03-24 21:05 by greychen00
[考研] 07化学280分求调剂 +6 722865 2026-03-23 6/300 2026-03-24 20:58 by allen-yin
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 招08考数学 +7 laoshidan 2026-03-20 16/800 2026-03-24 17:52 by 乌拉儿山脉
[考研] 299求调剂 +7 某某某某位 2026-03-21 7/350 2026-03-24 15:24 by cuifj
[考研] 一志愿华东理工大学081700,初试分数271 +5 kotoko_ik 2026-03-23 6/300 2026-03-24 10:29 by 学术搬砖er
[考研] 335求调剂 +4 yuyu宇 2026-03-23 5/250 2026-03-23 23:49 by Txy@872106
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 336化工调剂 +4 王大坦1 2026-03-23 5/250 2026-03-23 18:32 by allen-yin
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 298求调剂 +8 上岸6666@ 2026-03-20 8/400 2026-03-23 11:02 by laoshidan
[考研] 315分,诚求调剂,材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 287求调剂 +8 晨昏线与星海 2026-03-19 9/450 2026-03-22 17:01 by i_cooler
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 收复试调剂生 +4 雨后秋荷 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:16 by elevennnne
信息提示
请填处理意见