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求分析琼脂糖凝胶电泳图 已有4人参与
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求助各位大侠，我刚提取一次质粒，跑出来两条带，但是最下沿有不甚清晰地一条带，请问是为什么？如下图所示： 另外一个比较奇怪的的是，我把质粒用一系列浓度的DNase Ⅰ酶切之后跑电泳，上面两条带都没了，只剩下下面的模糊带，但是为什么会有两道黑带呢（如图2），那又是什么？PS：我用的是6× loading buffer双染料  |
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liuderong
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2楼2014-03-09 20:26:00
lvbobo823
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3楼2014-03-09 21:16:12
【答案】应助回帖
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质粒有三种构型。第一种是共价闭合环状DNA(covalently close circular DNA，ccc DNA)，它的两条链都保持完整的环状结构，通常呈超螺旋构型。第二种是开环DNA(open circularDNA，oc DNA)，它的双链中的一条保持完整的环状结构，另一条单链上有一到几个切口。第三种是线状DNA，这种质粒的双链断裂呈线状。这三种构型的同一种质粒在琼脂糖凝胶中电泳时，出现不同的迁移速率，走得最快的是超螺旋构型，其次是线性构型，最慢的是开环构型。 一般提质粒跑胶，都会出现3条带，质粒图上2条带很正常。 |
4楼2014-03-10 10:01:30
5楼2014-03-10 11:55:04
