24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 3354  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

linglingerl

金虫 (初入文坛)

[求助] 求分析琼脂糖凝胶电泳图 已有4人参与

求助各位大侠,我刚提取一次质粒,跑出来两条带,但是最下沿有不甚清晰地一条带,请问是为什么?如下图所示:
求分析琼脂糖凝胶电泳图

另外一个比较奇怪的的是,我把质粒用一系列浓度的DNase Ⅰ酶切之后跑电泳,上面两条带都没了,只剩下下面的模糊带,但是为什么会有两道黑带呢(如图2),那又是什么?PS:我用的是6× loading buffer双染料
求分析琼脂糖凝胶电泳图-1
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-03-10 08:28:44
建议跑胶时加个Marker第一个图质粒有两条带很正常一条是线性化质粒,一条是超螺旋化质粒,最下面是你抽提质粒RNA或蛋白没有去除干净。第二图质粒被消化后这两条黑带是你的Loading buffer的带。
hehe
3楼2014-03-09 21:16:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

liuderong

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-03-10 08:28:39
上面那幅图是质粒条带,质粒分超螺旋、线形和开环三种形态,电泳显示大小不一样,跑出两三条带很正常的。下面是没有完全降解的RNA。
下面那幅图的亮带应该是降解的DNA(或者混有RNA),两条黑带是溴酚蓝显色的结果,电泳时溴酚蓝加多了就是这种样子。第一个泳道黑带部分还隐约可见有亮带,那个应该就是质粒,其他泳道相同位置应该也有带的,只是量很少,还被溴酚蓝遮住了,所以看不到。
2楼2014-03-09 20:26:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liulugang

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
linglingerl(gyesang代发): 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 16:08:13
质粒有三种构型。第一种是共价闭合环状DNA(covalently close circular DNA,ccc DNA),它的两条链都保持完整的环状结构,通常呈超螺旋构型。第二种是开环DNA(open circularDNA,oc DNA),它的双链中的一条保持完整的环状结构,另一条单链上有一到几个切口。第三种是线状DNA,这种质粒的双链断裂呈线状。这三种构型的同一种质粒在琼脂糖凝胶中电泳时,出现不同的迁移速率,走得最快的是超螺旋构型,其次是线性构型,最慢的是开环构型。
一般提质粒跑胶,都会出现3条带,质粒图上2条带很正常。
4楼2014-03-10 10:01:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
linglingerl(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-03-31 16:08:23
黑带什么的都与你的质粒载体无关,现在你的问题时想办法加大酶切之后质粒的量,很明显这酶切之后的量根本不够后续实验。可以通过加大酶切体系来实现。
我不会!
5楼2014-03-10 11:55:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 267求调剂 +5 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 5/250 2026-04-09 18:47 by stone_128
[考研] 材料调剂 +10 18815505510 2026-04-09 11/550 2026-04-09 17:07 by 544594351
[考研] 291求调剂 +7 关忆北. 2026-04-09 8/400 2026-04-09 15:17 by 探123
[考研] 22408 270分 +9 sanjin020722 2026-04-08 10/500 2026-04-09 14:11 by 诗与自由
[考研] 285求调剂 +9 AZMK 2026-04-07 10/500 2026-04-09 10:29 by 小物理化学
[考研] 288求调剂 +15 没有答案_ 2026-04-05 15/750 2026-04-09 10:22 by 5268321
[考研] 336求调剂,一志愿中科大 +9 墨彧 yuyu 2026-04-06 9/450 2026-04-08 11:24 by 想读书的菌菌
[考研] 298求调剂 +6 钉叮咚冬瓜 2026-04-07 8/400 2026-04-08 10:51 by 中飞院空管学院
[考研] 363求调剂 +9 zh096 2026-04-04 9/450 2026-04-07 21:51 by 418490947
[考研] 生物工程求调剂 +13 喜欢还是不甘心 2026-04-05 13/650 2026-04-07 16:55 by Ecowxq666!
[考研] 287分求调剂 有专利国奖一志愿哈工大085406 +6 白易辰 2026-04-06 7/350 2026-04-06 22:46 by 875465
[考研] 362求调剂一志愿中国石油大学 +4 我要考大 2026-04-06 6/300 2026-04-06 14:11 by 无际的草原
[考研] 319求调剂 +3 handrui 2026-04-05 3/150 2026-04-06 09:33 by jp9609
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-04 4/200 2026-04-05 09:44 by zhq0425
[考研] 083200 333求调剂 +3 十二!! 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:28 by barlinike
[考研] 材料与化工306分找调剂 +12 沧海轻舟e 2026-04-03 13/650 2026-04-04 23:45 by lqwchd
[考研] 309求调剂 +4 快乐的小白鸽 2026-04-04 5/250 2026-04-04 15:55 by cql1109
[考研] 085701求调剂 +7 龚禹铭 2026-04-04 8/400 2026-04-04 13:49 by 小小树2024
[考研] 材料调剂 +11 吴棂颖! 2026-04-03 11/550 2026-04-04 09:56 by 小小树2024
[考研] 322求调剂 +4 FZAC123 2026-04-03 4/200 2026-04-03 20:55 by zhq0425
信息提示
请填处理意见