转化遭遇红霉素对大肠杆菌失效!
各位同学:
我现在准备将表达载体pMG36e转入大肠杆菌,转化之后平板(红霉素终浓度250ug/ml)上长满菌(现象如抗生素失效一样),但是红霉素配好之后是经过验证有效的。从转化平板上挑起来的菌转入液体培养基(红霉素终浓度200ug/ml),12小时不长,24小时就长。我已经卡在这一步很久了,望大家不吝赐教~~~感激不尽! 返回小木虫查看更多
今日热帖
各位同学:
我现在准备将表达载体pMG36e转入大肠杆菌,转化之后平板(红霉素终浓度250ug/ml)上长满菌(现象如抗生素失效一样),但是红霉素配好之后是经过验证有效的。从转化平板上挑起来的菌转入液体培养基(红霉素终浓度200ug/ml),12小时不长,24小时就长。我已经卡在这一步很久了,望大家不吝赐教~~~感激不尽! 返回小木虫查看更多
验证一下吧,一块平板加50%抗生素浓度涂正常转化菌,第二块正常抗生素浓度涂转化空载的菌,第三块正常抗生素浓度涂转化无菌水的菌,在验证实验前,清洁实验环境,
,
大肠对红霉素有自身抗性,建议浓度加到400