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huanglei0517

新虫 (初入文坛)

[交流] 转化遭遇红霉素对大肠杆菌失效!已有3人参与

各位同学:
       我现在准备将表达载体pMG36e转入大肠杆菌,转化之后平板(红霉素终浓度250ug/ml)上长满菌(现象如抗生素失效一样),但是红霉素配好之后是经过验证有效的。从转化平板上挑起来的菌转入液体培养基(红霉素终浓度200ug/ml),12小时不长,24小时就长。我已经卡在这一步很久了,望大家不吝赐教~~~感激不尽!
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Crazy cat

铜虫 (小有名气)



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验证一下吧,一块平板加50%抗生素浓度涂正常转化菌,第二块正常抗生素浓度涂转化空载的菌,第三块正常抗生素浓度涂转化无菌水的菌,在验证实验前,清洁实验环境,

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2楼2018-06-08 14:12:22
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biosci

捐助贵宾 (著名写手)



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大肠对红霉素有自身抗性,建议浓度加到400

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3楼2018-06-08 19:19:54
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小小孙ss

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
1楼: Originally posted by huanglei0517 at 2018-06-07 21:31:12
各位同学:
       我现在准备将表达载体pMG36e转入大肠杆菌,转化之后平板(红霉素终浓度250ug/ml)上长满菌(现象如抗生素失效一样),但是红霉素配好之后是经过验证有效的。从转化平板上挑起来的菌转入液体培养基 ...

咱俩的情况一样,战友啊,您的问题解决了吗?请问您用的什么牌子的红霉素,还有哪家的感受态细胞

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4楼2018-06-13 23:42:12
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