哪位大神帮忙分析一下PCR电泳图！
各位帮忙看一下电泳图，新设计的引物，TM值分别为53.6和54.7，20ul体系:模板2ul, 2 x taq mastermix 10ul,两引物各4ul(10uM),
条件是95℃5min,95℃ 30s 50℃1min72℃90S,三十个循环，72℃10min,4℃保存。
目的条带是1200左右，marker是DL2000，电泳之后,750-1000有条带，不知道什么原因，而且200左右明显有很亮的条带。求各位大神指导，这样的提高退火温度有用吗？还有什么方法可以优化一下？
PCR 50.JPG
PCR .JPG
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京公网安备 11010802022153号
引物浓度太高了，我正反向引物各0.6ul，浓度是5uM,再把你的退火温度稍微调高点，大概53℃吧。试试看
做的什么模版的啊
阴性对照有没有条带？如果有，那就是有引物二聚体。
胶都跑得快跳海了，跑二分之一多一点就好
引物也太多了吧。我25微体系 引物总共2微
引物加太多，我20ul体系一般就加稀释10倍的引物0.8ul，还有退火温度不对，应该先做个退火温度梯度，确定最优温度，
引物太多，一般50ul体系才加1ul，下面的应该是引物二聚体