24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2415  |  回复: 5

nbadlq

铁虫 (初入文坛)

[求助] 质粒连接转化后变小 已有1人参与

质粒用的PIB139,大约6KB,目的基因1.5KB,酶切纯化跑胶验证是对的。然后做链接20ul体系,2ul质粒8ul目的基因。取9ul连接产物转化后,在板上长得感觉不错。试剂盒提取质粒跑胶验证出现了怪现象。重组质粒变小了,质粒酶切貌似也切不开。

质粒连接转化后变小
酶切纯化质粒和目的基因.jpg


质粒连接转化后变小-1
P51025-094112.jpg


质粒连接转化后变小-2
原质粒、连接质粒、连接质粒后面是双酶切
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nbadlq

铁虫 (初入文坛)

做了两个多月了,一直得不到想要的结果。希望高手帮忙。
以前用这个质粒连接1KB片段,一次成功。      别沉
2楼2015-10-26 17:19:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尘梦心殇

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by nbadlq at 2015-10-26 17:19:33
做了两个多月了,一直得不到想要的结果。希望高手帮忙。
以前用这个质粒连接1KB片段,一次成功。      别沉

楼主有知道原因吗?我现在也是这样,质粒连接好之后,变小了,但目标片段都能p出来。
考虑是质粒酶切连接后,超螺旋状态,但不知道是不是。

发自小木虫Android客户端
3楼2022-01-13 18:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

局也土豆

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 尘梦心殇 at 2022-01-13 18:01:36
楼主有知道原因吗?我现在也是这样,质粒连接好之后,变小了,但目标片段都能p出来。
考虑是质粒酶切连接后,超螺旋状态,但不知道是不是。
...

去测一下序,看看是不是你的基因

发自小木虫Android客户端
4楼2022-01-18 21:29:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

澍上莓果儿

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 尘梦心殇 at 2022-01-13 18:01:36
楼主有知道原因吗?我现在也是这样,质粒连接好之后,变小了,但目标片段都能p出来。
考虑是质粒酶切连接后,超螺旋状态,但不知道是不是。
...

我的之前连上的目的片段现在都P不出来了,也不知道咋回事,求各路大神指点!
5楼2022-06-24 14:36:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乌克兰跑男

铜虫 (正式写手)

难呀   解决不了  重复吧

发自小木虫Android客户端
我思故我在
6楼2022-08-09 22:22:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 nbadlq 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 290求调剂 +11 luoziheng 2026-04-10 11/550 2026-04-11 21:45 by cfdbai
[考研] 调剂求收留 +21 果然有我 2026-04-10 22/1100 2026-04-11 21:37 by 蓝云思雨
[考研] 材料考研调剂 +23 云木达达 2026-04-11 25/1250 2026-04-11 17:50 by tj2m
[考研] 一志愿085502,267分求调剂 +11 再忙也要吃饭啊 2026-04-08 12/600 2026-04-11 11:08 by zhq0425
[考研] 还有化工二轮调剂的学校吗 5+14 化工人999 2026-04-09 48/2400 2026-04-11 10:27 by 89436494
[考研] 工科273调剂 +6 X1999 2026-04-09 7/350 2026-04-11 10:23 by zhq0425
[考研] 22408 327分求调剂 +4 韵风kon 2026-04-10 4/200 2026-04-11 09:51 by 猪会飞
[考研] 本科南方医科大学 一志愿985 药学学硕284分 求调剂 +4 弱水听文 2026-04-09 4/200 2026-04-10 22:01 by doctff
[考研] 一志愿0703化学招61最终排名62化学求调剂 +24 招61排名62 2026-04-07 28/1400 2026-04-10 16:15 by yx54321
[考研] 071000生物学调剂求助 +17 zzzzwww 2026-04-09 20/1000 2026-04-10 15:55 by 求调剂zz
[考研] 349学科化学045106求调剂,化学类都可以 +8 保好懂懂 2026-04-08 8/400 2026-04-09 14:03 by xulei3024
[考研] 288求调剂 +15 没有答案_ 2026-04-05 15/750 2026-04-09 10:22 by 5268321
[考研] 353求调剂 +8 晴空万里air 2026-04-07 8/400 2026-04-09 00:18 by GouQ
[考研] 求调剂 +13 柒luck 2026-04-07 13/650 2026-04-08 22:46 by 猪会飞
[考研] 软件工程求调剂22软工296分求调剂,接受跨调 +4 yangchen2017 2026-04-08 5/250 2026-04-08 21:56 by 土木硕士招生
[考研] 293分求调剂,外语为俄语 +7 加一一九 2026-04-07 10/500 2026-04-08 20:14 by yutian743
[考研] 一志愿华东理工085601材料工程303分求调剂 +15 a1708 2026-04-06 15/750 2026-04-08 16:23 by luoyongfeng
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +16 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-05 16/800 2026-04-08 16:02 by luoyongfeng
[考研] 304求调剂 +16 c297914 2026-04-05 17/850 2026-04-08 13:00 by grayjzr
[考研] 344求调剂 +11 魏子per 2026-04-07 11/550 2026-04-07 23:01 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见