应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 质粒连接转化后变小
51/1返回列表
查看: 2637  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

nbadlq

铁虫 (初入文坛)

[求助] 质粒连接转化后变小 已有1人参与

质粒用的PIB139，大约6KB，目的基因1.5KB，酶切纯化跑胶验证是对的。然后做链接20ul体系，2ul质粒8ul目的基因。取9ul连接产物转化后，在板上长得感觉不错。试剂盒提取质粒跑胶验证出现了怪现象。重组质粒变小了，质粒酶切貌似也切不开。

质粒连接转化后变小
酶切纯化质粒和目的基因.jpg


质粒连接转化后变小-1
P51025-094112.jpg


质粒连接转化后变小-2
原质粒、连接质粒、连接质粒后面是双酶切
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2015-10-26 17:17:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

澍上莓果儿

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 尘梦心殇 at 2022-01-13 18:01:36
楼主有知道原因吗?我现在也是这样，质粒连接好之后，变小了，但目标片段都能p出来。
考虑是质粒酶切连接后，超螺旋状态，但不知道是不是。
...

我的之前连上的目的片段现在都P不出来了，也不知道咋回事，求各路大神指点！
赞一下 回复此楼
5楼2022-06-24 14:36:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

nbadlq

铁虫 (初入文坛)
做了两个多月了，一直得不到想要的结果。希望高手帮忙。
以前用这个质粒连接1KB片段，一次成功。      别沉
赞一下 回复此楼
2楼2015-10-26 17:19:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

尘梦心殇

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by nbadlq at 2015-10-26 17:19:33
做了两个多月了，一直得不到想要的结果。希望高手帮忙。
以前用这个质粒连接1KB片段，一次成功。      别沉

楼主有知道原因吗?我现在也是这样，质粒连接好之后，变小了，但目标片段都能p出来。
考虑是质粒酶切连接后，超螺旋状态，但不知道是不是。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2022-01-13 18:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

局也土豆

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 尘梦心殇 at 2022-01-13 18:01:36
楼主有知道原因吗?我现在也是这样，质粒连接好之后，变小了，但目标片段都能p出来。
考虑是质粒酶切连接后，超螺旋状态，但不知道是不是。
...

去测一下序，看看是不是你的基因

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2022-01-18 21:29:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 G6APbkg8SA6w 2026-08-29 4/200 2026-08-29 22:27 by ZPa0EcMwuECS
[基金申请] 国社科申报系统有变化 +3 kynobel 2026-08-23 3/150 2026-08-29 21:57 by 余韵清
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 gy1nBQXYQJqL 2026-08-29 5/250 2026-08-29 21:33 by 4qO8zhfjr2AX
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 11/550 2026-08-29 20:18 by 63GmZBFV29mG
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +5 德尚中行 2026-08-27 6/300 2026-08-29 18:10 by manplx
[公派出国] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 17:30 by 4FFAWE8HcgUD
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +4 tannykie 2026-08-29 4/200 2026-08-29 17:14 by lmz0216
[找工作] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ASdOkHsho7FD 2026-08-28 6/300 2026-08-29 11:51 by jCd0dEvKHShX
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 申请删除本帖 +6 lyz123lyz 2026-08-27 7/350 2026-08-27 17:31 by 宁静致远sy
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +5 叶九微 2026-08-26 5/250 2026-08-27 10:35 by l_zh2008
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +7 process2012 2026-08-23 10/500 2026-08-26 19:23 by hmhminy
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +23 koalala 2026-08-24 26/1300 2026-08-26 14:29 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合现在查不到了吗？ +10 chengyan1220 2026-08-24 20/1000 2026-08-26 08:57 by peasantsprig
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候，我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 明天应该可查了！？ +6 chengyan1220 2026-08-23 6/300 2026-08-25 19:45 by zfd97
[基金申请] 某些机构，以效率低为荣，以效率低作为存在感 +9 yuleib84 2026-08-25 10/500 2026-08-25 17:14 by alexon
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +8 scalable 2026-08-24 8/400 2026-08-25 12:52 by jnhyjjm
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭