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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 请高手分析一下条带 为什么会拖尾？点样孔亮是什么原因？
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张狗狗123

新虫 (初入文坛)

[求助] 请高手分析一下条带 为什么会拖尾？点样孔亮是什么原因？ 已有3人参与

PCR-ARMS等位基因PCR进行分型 marker 是100-700 目的片段265bp 梳子用的是大孔的 电压130V 60min 缓冲液0.5的TBE 上样量一共12ul（10ul的PCR p出来的目的DNA，2ul的loading buffer）琼脂糖凝胶2.5% 染色用的EB 为什么跑出的条带这么难看 拖尾是什么原因？ 点样孔亮是什么原因？本人是新手 刚入门 请高手帮忙！两个图都是一样的 一块大胶（用的大孔梳子）一块小胶（小孔梳子） 小孔上样量总共6ul 其他的条件都是一样的 一块电泳！

请高手分析一下条带 为什么会拖尾？点样孔亮是什么原因？
pcr2.png


请高手分析一下条带 为什么会拖尾？点样孔亮是什么原因？-1
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1楼 2016-01-20 17:16:25
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

匿名

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-02-23 22:23:26
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5楼2016-01-20 22:00:07
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自嗨_sea

新虫 (初入文坛)
用的模板是什么？如果是复杂模板的话感觉有时候会这样，我有时候做菌种鉴定也会有这样的情况。
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6楼2016-01-22 15:17:21
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匿名

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2楼2016-01-20 18:01:22
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南宫逸轩

新虫 (小有名气)
这个，胶没煮好，而且可能凝的时间可能有点短

发自小木虫Android客户端
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3楼2016-01-20 21:37:00
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张狗狗123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 626333799 at 2016-01-20 18:01:22
胶做的不好吧，溶得不均匀

胶都是在微波炉里煮的  打开后 看到胶还沸腾   应该怎么煮胶？
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4楼2016-01-20 21:51:29
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品茗听雨0530

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
胶煮的时间短了，并且煮完没有混匀。
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7楼2016-01-22 22:05:41
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q120465872

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-02-23 22:23:46
检查下电流，缓冲液是否新配。缓冲液用久了电流过大跑胶时间过长也会造成这样的结果。条带跑的难看，因为marker也一样，所以只可能是胶不均匀和我说的这个问题了。点样孔可能是蛋白，模板的纯度问题，稀释倍数提高点应该还好。

发自小木虫IOS客户端
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赐予我力量，去改变我所能改变的；赐予我勇气，去接受我所不能改变的；并赐予我智慧，去分辨这两者。
8楼2016-01-22 22:14:05
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张狗狗123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by q120465872 at 2016-01-22 22:14:05
检查下电流，缓冲液是否新配。缓冲液用久了电流过大跑胶时间过长也会造成这样的结果。条带跑的难看，因为marker也一样，所以只可能是胶不均匀和我说的这个问题了。点样孔可能是蛋白，模板的纯度问题，稀释倍数提高点 ...

谢谢  经验证确实是胶的问题
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9楼2016-02-23 17:09:09
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张狗狗123

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 品茗听雨0530 at 2016-01-22 22:05:41
胶煮的时间短了，并且煮完没有混匀。

谢谢  经验证确实是胶的问题
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10楼2016-02-23 17:09:24
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