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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】请高手帮忙解决转化感受态细胞的问题
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liulanhua

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请高手帮忙解决转化感受态细胞的问题已有6人参与

我用含30ug/ml的卡那霉素筛选有抗性的转化后的DH5a,在平板上长了很多菌落，就挑了两个菌落扩大培养，提取质粒，然后跑电泳，我的质粒大小是5.4kb，而电泳结果只在10kb-11kb之间的地方有条带，请高手们帮我分析一下哪个地方最可能出错吧？
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努力会有收获！
1楼2011-01-17 19:43:43
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liulanhua

金虫 (正式写手)
★
dhd997(金币+1): 可以在第一楼编辑，欢迎交流。 2011-01-18 08:55:14
引用回帖:
Originally posted by liulanhua at 2011-01-17 19:43:43:
我用含30ug/ml的卡那霉素筛选有抗性的转化后的DH5a,在平板上长了很多菌落，就挑了两个菌落扩大培养，提取质粒，然后跑电泳，我的质粒大小是5.4kb，而电泳结果只在10kb-11kb之间的地方有条带，请高手们帮我分析一下 ...

不好意思，单位写错了，是5.4bp，电泳电泳条带在10bp-11bp之间。由于不是生物专业的，搞不太清楚。
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努力会有收获！
2楼2011-01-17 21:15:30
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by liulanhua at 2011-01-17 21:15:30:

不好意思，单位写错了，是5.4bp，电泳电泳条带在10bp-11bp之间。由于不是生物专业的，搞不太清楚。



质粒大小怎么可能是5.4bp呢？！

你一开始写的是对的吧
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千万不要因为走的太久，而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
3楼2011-01-17 22:57:13
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QIAO4984

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
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dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-01-18 08:54:32
太假了吧  


果然不是生物专业的   应该是5.4kb      5400 base pair
10-11KB的话   应该是

假阳性  杂菌    不是转化的东西
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4楼2011-01-17 23:34:04
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turfgrass

金虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
dhd997(金币+1): 谢谢交流 2011-01-18 08:54:43
测序就知道了，先测一个正向和一个反向，看看对不对。费用很低，50-70元吧
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一切皆有可能！
5楼2011-01-17 23:38:56
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liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by rainwander at 2011-01-17 22:57:13:




质粒大小怎么可能是5.4bp呢？！

你一开始写的是对的吧


真是丢人了，呵呵，刚开始写的是正确的。
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努力会有收获！
6楼2011-01-18 08:48:34
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liulanhua

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by turfgrass at 2011-01-17 23:38:56:
测序就知道了，先测一个正向和一个反向，看看对不对。费用很低，50-70元吧

我没有进行酶切鉴定和PCR鉴定就去测序，不太好吧，有可能拿到阴性结果吧？
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努力会有收获！
7楼2011-01-18 09:07:23
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wzwhq

铁虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
建议换一批感受态重新转吧
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8楼2011-01-18 10:35:42
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israfale

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
9楼2011-01-18 12:11:53
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