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liulanhua

金虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】请高手帮忙解决转化感受态细胞的问题 已有6人参与

我用含30ug/ml的卡那霉素筛选有抗性的转化后的DH5a,在平板上长了很多菌落,就挑了两个菌落扩大培养,提取质粒,然后跑电泳,我的质粒大小是5.4kb,而电泳结果只在10kb-11kb之间的地方有条带,请高手们帮我分析一下哪个地方最可能出错吧?
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liulanhua

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by turfgrass at 2011-01-17 23:38:56:
测序就知道了,先测一个正向和一个反向,看看对不对。费用很低,50-70元吧

我没有进行酶切鉴定和PCR鉴定就去测序,不太好吧,有可能拿到阴性结果吧?
努力会有收获!
7楼2011-01-18 09:07:23
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liulanhua

金虫 (正式写手)


dhd997(金币+1): 可以在第一楼编辑,欢迎交流。 2011-01-18 08:55:14
引用回帖:
Originally posted by liulanhua at 2011-01-17 19:43:43:
我用含30ug/ml的卡那霉素筛选有抗性的转化后的DH5a,在平板上长了很多菌落,就挑了两个菌落扩大培养,提取质粒,然后跑电泳,我的质粒大小是5.4kb,而电泳结果只在10kb-11kb之间的地方有条带,请高手们帮我分析一下 ...

不好意思,单位写错了,是5.4bp,电泳电泳条带在10bp-11bp之间。由于不是生物专业的,搞不太清楚。
努力会有收获!
2楼2011-01-17 21:15:30
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)

优秀版主


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by liulanhua at 2011-01-17 21:15:30:

不好意思,单位写错了,是5.4bp,电泳电泳条带在10bp-11bp之间。由于不是生物专业的,搞不太清楚。



质粒大小怎么可能是5.4bp呢?!

你一开始写的是对的吧

千万不要因为走的太久,而忘记了我们为什么出发~~~~~~ForDream~~~~~~
3楼2011-01-17 22:57:13
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QIAO4984

铜虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-01-18 08:54:32
太假了吧  


果然不是生物专业的   应该是5.4kb      5400 base pair
10-11KB的话   应该是

假阳性  杂菌    不是转化的东西
4楼2011-01-17 23:34:04
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