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新虫 (初入文坛)

[求助] 帮忙分析一下电泳图，条带不清，不亮

请跑琼脂糖电泳的高手们帮我分析一下我的电泳图是怎么回事？目的片段2400bp，2000的marker。1%的琼脂糖凝胶，160V电泳10-15分钟。退火温度62，延伸1分30秒，35个循环

dell 2012-10-31 19hr 22min.jpg

1楼 2012-11-03 20:48:41

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铁杆木虫 (职业作家)

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感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-11-04 09:25:56

你PCR用的是什么聚合酶？如果是Taq最好用2.5分钟延时（1kb/min）。marker也跑得不好，可能胶做的不好。缓冲液是新配的吗？

2楼2012-11-04 03:48:11

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铜虫 (小有名气)

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分享经验 2012-11-09 08:22:10

你可以把延伸时间加长一点，我个人觉得可能是你的模板量很低，你可以把你的pcr产物，在做一次pcr，这样会得到比较多的pcr产物。另外，你的用的胶浓度有点低，maker都没有跑开，建议2%。

3楼2012-11-05 15:17:16

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新虫 (小有名气)

★
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与，请注意语气 2012-11-09 08:22:33

maker都没跑好…先练练技术吧。循环数加大

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

少壮不努力，长大pcr

4楼2012-11-08 23:42:07

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