应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 双酶切，EcoR1和Not1，切T载体
51/1返回列表
查看: 4810  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

万法唯心

新虫 (小有名气)

[交流] 双酶切，EcoR1和Not1，切T载体 已有9人参与

37度，切24小时没有切开或者是弥散了，用的是EcoR1的buffer，30ul体系，质粒10，水13，buffer3，两个酶各2，体系有问题吗？还是条件不好？

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-01-08 17:05:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

原海亮

木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
首先，楼主先要确定质粒有没有问题，比如浓度如何，是否提取到。然后酶切的话时间太长，之前用慢酶的时候也只是五六小时吧，现在快酶半小时左右

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
天空才是极限，我有信心飞的更高！
7楼2016-01-10 23:17:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

反应链

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
NotI endonuclease works in single digestion? It is CpG Methylation sensitive.

According to Takara Products Catolog, double digestion with EcoRI and NotI should be supplied with BSA.
双酶切，EcoR1和Not1，切T载体
pMD18-T.jpg
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2016-01-08 20:03:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiangshengyan

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
use EcoRI-HF and NotI-HF; NEB Cut smart buffer 2 hours digestion is enough
赞一下(1人) 回复此楼
ANNA&KEVIN
3楼2016-01-09 11:38:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

万法唯心

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by xiangshengyan at 2016-01-09 11:38:07
use EcoRI-HF and NotI-HF; NEB Cut smart buffer 2 hours digestion is enough

没有呀，我们只有thermo scientific的酶，请问我条件应该怎么改

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2016-01-09 12:22:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭