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双酶切实验
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我用的酶切位点是EcoR1和 Not1，问题是我的EcoR1是takara家的，Not1是fermentas家的，他们的体系不太一样，EcoR1用的是10x H buffer，Not1用的是10x buffer O， 哪位大侠能指点一下，双酶切实验，这两个试剂能一块用不呢。这两个buffer应该是不是只是标示方法不同呢，求解中。。。 |
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2楼2012-12-12 17:34:47
木风弓玄
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【答案】应助回帖
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一般来说，你可以查找takara或fermentas公司的双酶切buffer兼容性方面的信息，只要任何一个公司有兼容的buffer，你就可以用于你的双酶切（即使两种酶来自不同的公司）。 如果为了方便，你可以用doulbe digestion designer进行双酶切设计，这个软件不仅可以精确计算双酶切时各种酶的用量（确保完全酶切），而且可以推荐合适的双酶切buffer。该软件中一个很好用的功能，就是专门用于设计两种酶来自不同供应商时的双酶切，可以自动推荐双酶切buffer.我用此软件帮你设计了一下，你可以考虑用MBI的fast digestion buffer或者takara公司的1*buffer H+BSA+TritonX100。该软件是在线软件，可以免费试用，具体链接如下：http://www.bioinfomatics.cn/enzyme/login.php 祝好运 |
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Cllair6楼2012-12-12 22:30:32
westerli
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10楼2012-12-13 09:02:49
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