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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切实验
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Cllair

金虫 (小有名气)
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10楼: Originally posted by ypan at 2012-12-13 09:02:49
不是同一个厂家的内切酶，Buffer很难兼容，还有可能会产生星活性。还是选用一家公司的酶和Buffer用。

啊，悲剧，谢谢哈。
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11楼2012-12-13 10:01:12
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Cllair

金虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by hourl11 at 2012-12-12 17:34:47
一个一个切，比如先用EcoR1切，体系什么的都用他们家推荐的，然后用PCR产物纯化试剂盒做纯化，回收到的产物直接进行Not1酶切，体系也都换他们家的。

谢谢，不过我还没有PCR产物纯化试剂盒，只有PCR产物胶回收试剂盒，我会试试的，谢啦
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12楼2012-12-13 10:05:56
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Cllair

金虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by 木风弓玄 at 2012-12-12 20:02:00
楼上正解 公司不同 buffer不同用

收到，谢啦
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13楼2012-12-13 10:06:25
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Cllair

金虫 (小有名气)
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4楼: Originally posted by fuyin at 2012-12-12 20:05:41
可以先做一个酶切，然后进行胶回收，在做另外一个酶切。

对哦，谢谢哈。我这会做着酶切呢，如果双酶切的没有成功的话，我就将单酶切的回收做另一个酶切。
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14楼2012-12-13 10:08:15
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Cllair

金虫 (小有名气)
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5楼: Originally posted by useless at 2012-12-12 22:12:36
可以选择任意一个公司的双酶切体系同时进行双酶切。

如果现在的试剂做不成功的话，我会考虑购买试剂的。谢谢
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15楼2012-12-13 10:09:04
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Cllair

金虫 (小有名气)
送鲜花一朵
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6楼: Originally posted by 酶切专家 at 2012-12-12 22:30:32
一般来说，你可以查找takara或fermentas公司的双酶切buffer兼容性方面的信息，只要任何一个公司有兼容的buffer，你就可以用于你的双酶切（即使两种酶来自不同的公司）。
如果为了方便，你可以用doulbe digestion d ...

小女子好感动啊，谢谢哈，我会先试用一下takara公司的1*buffer H+BSA+TritonX100，我也祝自己好运。
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16楼2012-12-13 10:12:52
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damaomao

禁虫 (正式写手)
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17楼2012-12-13 10:14:49
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