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Cllair

金虫 (小有名气)

[求助] 双酶切实验

我用的酶切位点是EcoR1和 Not1,问题是我的EcoR1是takara家的,Not1是fermentas家的,他们的体系不太一样,EcoR1用的是10x H buffer,Not1用的是10x buffer O,
哪位大侠能指点一下,双酶切实验,这两个试剂能一块用不呢。这两个buffer应该是不是只是标示方法不同呢,求解中。。。
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有今生没来世,且行且珍惜。
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酶切专家

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
一般来说,你可以查找takara或fermentas公司的双酶切buffer兼容性方面的信息,只要任何一个公司有兼容的buffer,你就可以用于你的双酶切(即使两种酶来自不同的公司)。
如果为了方便,你可以用doulbe digestion designer进行双酶切设计,这个软件不仅可以精确计算双酶切时各种酶的用量(确保完全酶切),而且可以推荐合适的双酶切buffer。该软件中一个很好用的功能,就是专门用于设计两种酶来自不同供应商时的双酶切,可以自动推荐双酶切buffer.我用此软件帮你设计了一下,你可以考虑用MBI的fast digestion buffer或者takara公司的1*buffer H+BSA+TritonX100。该软件是在线软件,可以免费试用,具体链接如下:http://www.bioinfomatics.cn/enzyme/login.php
祝好运

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6楼2012-12-12 22:30:32
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hourl11

禁虫 (初入文坛)


感谢参与,应助指数 +1
1949stone: 金币+1, 鼓励 2012-12-12 17:54:09
本帖内容被屏蔽

2楼2012-12-12 17:34:47
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木风弓玄

铁虫 (初入文坛)

楼上正解 公司不同 buffer不同用
学海无涯
3楼2012-12-12 20:02:00
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fuyin

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以先做一个酶切,然后进行胶回收,在做另外一个酶切。
4楼2012-12-12 20:05:41
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