应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
111/2返回列表12下一页
查看: 1660  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lqs075

银虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切

最近在做双酶切，用的是EcoR 1和Hind 3，请问要怎样才能得到比较好的结果呢？我同时加两种酶和它们相对应的buffer 进去的话，会不会相互影响呢？求各位大师指点
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2012-03-19 21:35:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chui2004

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果使用的是TAKARA的酶，在酶切体系中加1XM就可以了！
赞一下 回复此楼
相信自己，一定能成功！
2楼2012-03-19 22:08:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lqs075

银虫 (初入文坛)
可以再说得明白些吗？
赞一下 回复此楼
3楼2012-03-19 22:57:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励应助 2012-03-20 12:05:58
楼主用的是哪家的酶？试剂公司对于双酶切一般都有推荐使用的缓冲液。譬如NEB的EcoR 1-HF和Hind 3-HF用buffer 4。对于TAKARA的用1XM （见http://www.takara.com.cn/?action ... d=69&subclass=1）。
赞一下 回复此楼
植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
4楼2012-03-19 23:16:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

panda73

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励 2012-03-20 12:06:18
lqs075: 金币+2, ★有帮助, 好，我去下一个看看 2012-03-20 21:08:06
我推荐过一款专门进行双酶切设计的在线软件，Double digestion designer，，可以自动推荐buffer，还可以精确计算酶切所需的酶量，对新手来说，很方便，你可以试试。http://www.bioinfomatics.cn/enzyme/login.php
赞一下 回复此楼
5楼2012-03-20 08:22:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rommel1941

铁杆木虫 (正式写手)

情定山河
建议去NEB的主页，有专门的双酶切软件http://www.neb-china.com/
祝好
赞一下 回复此楼
将相本无种★男儿当自强
6楼2012-03-20 09:04:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

王雨云

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励~ 2012-03-20 12:06:32
Double digestion designer我也用过，两种酶的通用buffer上面有介绍，每种酶在这种buffer里的剩余酶活页也会显示。
赞一下 回复此楼
7楼2012-03-20 11:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiafeimao21

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这2个酶我用过的，可以一起用。

按照说明书，严格操作。温度一定要把握准确，问题不大。
赞一下 回复此楼
8楼2012-03-20 16:20:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhixuec

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-03-21 08:04:42
我用的是TATARA的内切酶

这两种酶切效果还是可以的，我们一般用37℃水浴4h ，效果超好

后面做连接转化效率贼高~！
赞一下 回复此楼
酷爱の族
9楼2012-03-20 18:38:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lqs075

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by rommel1941 at 2012-03-20 09:04:10:
建议去NEB的主页，有专门的双酶切软件http://www.neb-china.com/
祝好

谢谢你的建议！不过貌似NEB的这两种酶不能同时用的耶
赞一下 回复此楼
10楼2012-04-22 00:19:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lqs075 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 328求调剂 +3 嗯滴的基本都 2026-03-27 3/150 2026-03-27 15:05 by 无际的草原
[考研] 材料与化工085600，总分304，本科有两篇sci参与，求调剂 +9 幸运的酱酱 2026-03-22 11/550 2026-03-27 14:45 by qazzjm
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 333求调剂 +3 question挽风 2026-03-23 3/150 2026-03-27 11:29 by 不吃魚的貓
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +6 kongweilin 2026-03-26 8/400 2026-03-27 10:18 by FF_16
[考研] 材料学硕333求调剂 +8 北道巷 2026-03-24 8/400 2026-03-27 10:18 by 我是小康
[考研] 材料学硕，求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 303求调剂 +7 元夕元 2026-03-20 8/400 2026-03-26 20:38 by 不吃魚的貓
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料，材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 8/400 2026-03-26 20:34 by Higraduate
[考研] 材料调剂 5+4 想要一壶桃花水 2026-03-25 10/500 2026-03-26 19:56 by 不吃魚的貓
[考研] 求调剂 +8 Auroracx 2026-03-22 8/400 2026-03-26 19:55 by 不吃魚的貓
[考研] 286求调剂 +13 Faune 2026-03-21 13/650 2026-03-26 19:52 by peike
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 求调剂一志愿武汉理工大学材料工程（085601） +5 WW.' 2026-03-23 7/350 2026-03-24 14:50 by sprinining
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭