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lqs075

银虫 (初入文坛)

[求助] 双酶切

最近在做双酶切,用的是EcoR 1和Hind 3,请问要怎样才能得到比较好的结果呢?我同时加两种酶和它们相对应的buffer 进去的话,会不会相互影响呢?求各位大师指点
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zhixuec

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+1, 鼓励应助 2012-03-21 08:04:42
我用的是TATARA的内切酶

这两种酶切效果还是可以的,我们一般用37℃水浴4h ,效果超好

后面做连接转化效率贼高~!
酷爱の族
9楼2012-03-20 18:38:55
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chui2004

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
如果使用的是TAKARA的酶,在酶切体系中加1XM就可以了!
相信自己,一定能成功!
2楼2012-03-19 22:08:47
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lqs075

银虫 (初入文坛)

可以再说得明白些吗?
3楼2012-03-19 22:57:16
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, 鼓励应助 2012-03-20 12:05:58
楼主用的是哪家的酶?试剂公司对于双酶切一般都有推荐使用的缓冲液。譬如NEB的EcoR 1-HF和Hind 3-HF用buffer 4。对于TAKARA的用1XM (见http://www.takara.com.cn/?action ... d=69&subclass=1)。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
4楼2012-03-19 23:16:00
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