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铿锵爪神

金虫 (正式写手)

[求助] PCR还是跑不出条带啊 已有6人参与

如题,新人做PCR,各种优化方法各种跑不出条带,超级虐心啊,求助大神帮忙,不胜感激

PCR还是跑不出条带啊
1.jpg
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wcq吴超群

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
写的详细点?反应体系?

发自小木虫Android客户端
2楼2015-11-04 21:13:57
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fengerwin1

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
铿锵爪神: 金币+1, 有帮助 2015-11-05 23:12:39
引物浓度是否过高?普通PCR退火55度一般没问题

发自小木虫IOS客户端
3楼2015-11-04 21:15:43
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陈爱中

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
pcr这种问题,问问同实验室的高年级同学就行了,可以问的更具体详细。
4楼2015-11-04 22:38:02
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 陈爱中 at 2015-11-04 22:38:02
pcr这种问题,问问同实验室的高年级同学就行了,可以问的更具体详细。

主要是实验室情况有些复杂,前辈都毕业了,一切都得自己摸索,真心伤不起啊

发自小木虫Android客户端
5楼2015-11-04 22:40:33
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陈爱中

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
铿锵爪神: 金币+1, 有帮助 2015-11-04 22:52:09
铿锵爪神: 金币+3 2015-11-08 09:52:33
引用回帖:
5楼: Originally posted by 铿锵爪神 at 2015-11-04 22:40:33
主要是实验室情况有些复杂,前辈都毕业了,一切都得自己摸索,真心伤不起啊
...

反应体系什么的你照着试剂使用说明的体系加就可以。

记住模板要稀释。
6楼2015-11-04 22:45:56
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 陈爱中 at 2015-11-04 22:45:56
反应体系什么的你照着试剂使用说明的体系加就可以。

记住模板要稀释。...

模板要稀释?我的模板是反转录得到的?还怎么稀释啊?我好像真没有稀释过

发自小木虫Android客户端
7楼2015-11-04 22:51:54
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陈爱中

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 铿锵爪神 at 2015-11-04 22:51:54
模板要稀释?我的模板是反转录得到的?还怎么稀释啊?我好像真没有稀释过
...

有可能你RT就失败了,根本没有你想象的cDNA!

发自小木虫IOS客户端
8楼2015-11-04 22:56:45
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shanyue00

铁杆木虫 (著名写手)

耐心说话,好好说话!
9楼2015-11-04 23:00:34
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铿锵爪神

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wcq吴超群 at 2015-11-04 21:13:57
写的详细点?反应体系?

25微的体系,模板和引物都是1微,Taq酶0.3微,dNTP4微,Taq Buffer2.5微,超纯水补充至25微

发自小木虫Android客户端
10楼2015-11-05 22:38:55
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