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t123om

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR跑不出条带是什么原因?具体如下 已有3人参与

最近在PCR的实验,3个月前就做过,同样的引物,3个月后就不能跑出条带了,合成了新的引物,也重新找过引物的浓度,mix也进行过更换,也试过更换电泳液,所用的模板也用过之前有结果的DNA,可是还是跑不出单一的条带,总是会出现拖尾现象(marker还是可以观察到的),请给位大神帮忙指正一下问题出在哪里,哪些地方还没有考虑到?
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2013101102

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-07-25 19:57:43
t123om: 金币+1, 有帮助 2015-07-29 21:24:29
是不是DNA 放置不对,降解了,所以会出现拖尾?
,越努力越幸运。
2楼2015-07-25 19:08:36
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小泓杨

捐助贵宾 (初入文坛)

初出茅庐

【答案】应助回帖

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t123om: 金币+1, 有帮助 2015-07-29 21:24:44
有这样一种说法,当DNA中含有的蛋白质时,也就是你的DNA样品不纯时,就有可能拖尾。也许不是这个原因,但是起码也要试一试。用除蛋白试剂试试。蛋白质的缩写Pr,抄写和打印时更方便,祝你好运。
中国的-boy 是一个缺心眼子!
3楼2015-07-25 19:27:22
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t123om

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 2013101102 at 2015-07-25 19:08:36
是不是DNA 放置不对,降解了,所以会出现拖尾?

可是之后确实也跑出来条带,但是新提取的DNA还是跑不出来,依旧是出现拖尾现象
4楼2015-07-29 20:31:27
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t123om

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 小泓杨 at 2015-07-25 19:27:22
有这样一种说法,当DNA中含有的蛋白质时,也就是你的DNA样品不纯时,就有可能拖尾。也许不是这个原因,但是起码也要试一试。用除蛋白试剂试试。蛋白质的缩写Pr,抄写和打印时更方便,祝你好运。

有可能会是这样的结果,但是我在提取DNA是加入了蛋白酶的,按理说是不会存在蛋白质的问题
5楼2015-07-29 20:32:32
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王小燕30

铜虫 (小有名气)

请问LZ现在还拖尾吗?
6楼2015-08-22 10:44:57
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洛可可薇薇

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

拖尾是不是P的时间不够长,条带没有完全跑完
7楼2015-08-22 11:18:43
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