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t123om

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR跑不出条带是什么原因？具体如下 已有3人参与

最近在PCR的实验，3个月前就做过，同样的引物，3个月后就不能跑出条带了，合成了新的引物，也重新找过引物的浓度，mix也进行过更换，也试过更换电泳液，所用的模板也用过之前有结果的DNA，可是还是跑不出单一的条带，总是会出现拖尾现象（marker还是可以观察到的），请给位大神帮忙指正一下问题出在哪里，哪些地方还没有考虑到？
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1楼 2015-07-25 16:46:44
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2013101102

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-07-25 19:57:43
t123om: 金币+1, ★有帮助 2015-07-29 21:24:29
是不是DNA 放置不对，降解了，所以会出现拖尾？
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,越努力越幸运。
2楼2015-07-25 19:08:36
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小泓杨

捐助贵宾 (初入文坛)

初出茅庐

【答案】应助回帖

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t123om: 金币+1, ★有帮助 2015-07-29 21:24:44
有这样一种说法，当DNA中含有的蛋白质时，也就是你的DNA样品不纯时，就有可能拖尾。也许不是这个原因，但是起码也要试一试。用除蛋白试剂试试。蛋白质的缩写Pr，抄写和打印时更方便，祝你好运。
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中国的-boy 是一个缺心眼子！
3楼2015-07-25 19:27:22
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t123om

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 2013101102 at 2015-07-25 19:08:36
是不是DNA 放置不对，降解了，所以会出现拖尾？

可是之后确实也跑出来条带，但是新提取的DNA还是跑不出来，依旧是出现拖尾现象
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4楼2015-07-29 20:31:27
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t123om

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 小泓杨 at 2015-07-25 19:27:22
有这样一种说法，当DNA中含有的蛋白质时，也就是你的DNA样品不纯时，就有可能拖尾。也许不是这个原因，但是起码也要试一试。用除蛋白试剂试试。蛋白质的缩写Pr，抄写和打印时更方便，祝你好运。

有可能会是这样的结果，但是我在提取DNA是加入了蛋白酶的，按理说是不会存在蛋白质的问题
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5楼2015-07-29 20:32:32
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王小燕30

铜虫 (小有名气)
请问LZ现在还拖尾吗？
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6楼2015-08-22 10:44:57
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洛可可薇薇

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

拖尾是不是P的时间不够长，条带没有完全跑完
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7楼2015-08-22 11:18:43
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