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waldenpond

金虫 (著名写手)

[求助] 今天做PCR,空白组竟然也跑出条带(还都是两条),大家帮忙找下原因

今天做PCR,空白组竟然也跑出条带(还都是两条),大家帮忙找下原因
因为图片不能拷,我就用画图做了个示意图,大家将就看一下,帮我找下原因吧。
谢谢!
*Marker 样本1 DNA和dd水(没有加DNA模板,作为空白组)
*不管样本1还是空白组都跑出了条带,而且是两条。
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回帖置顶 ( 共有1个 )

waldenpond

金虫 (著名写手)

西瓜: 回帖置顶 2012-04-02 11:17:54
引用回帖:
11楼: Originally posted by hejp03 at 2012-04-01 15:50:33:
很明显是出现了污染。
楼主操作应该注意下。
另外,把用的枪头,EP管等都进行灭菌处理。

应该是。今天我换了试剂,换了条件跑了一下。结果还可以。杂带没有了。
12楼2012-04-01 23:08:08
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普通回帖

bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
waldenpond: 金币+5, 有帮助 2012-03-31 21:48:28
西瓜: 金币+2, 鼓励应助 2012-04-02 11:15:39
你的这个图的方向是什么样的啊,Maker用的多大的啊,样品带中有你要的目的条带么?
1.如果样品中没有你要的条带,那可能是你引物设计的不合理,有非特异性扩增
2.也有可能是你水不达标吧,换一下试试呢
3.还有可能就是你在空白里面也不小心加了样品DNA了
2楼2012-03-31 19:37:54
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waldenpond

金虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bbwalkman at 2012-03-31 19:37:54:
你的这个图的方向是什么样的啊,Maker用的多大的啊,样品带中有你要的目的条带么?
1.如果样品中没有你要的条带,那可能是你引物设计的不合理,有非特异性扩增
2.也有可能是你水不达标吧,换一下试试呢
3.还有 ...

图的上方是加样孔。
3楼2012-03-31 21:48:01
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
waldenpond: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢各位专家虫友!我再去排查一遍。 2012-04-01 11:19:45
空白有带,证明有污染,在重复一次,如果空白没带了,说明是你操作出现问题;如果空白还是有一样的带,试剂有污染了

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
我就是我
4楼2012-04-01 00:20:22
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fwks

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
waldenpond: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢各位专家虫友!我再去排查一遍。 2012-04-01 11:20:01
水、枪头、PCR管、酶、引物本身都有可能是污染源,建议楼主从以上几方面进行逐个排除。
5楼2012-04-01 09:15:14
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chenxy

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
先换新的水,不行的话换新的引物,再不行就换新的酶。
行到水穷处,坐看云起时
6楼2012-04-01 09:42:00
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yixinyuan

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
waldenpond: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢各位专家虫友!我再去排查一遍。 2012-04-01 11:20:25
种种情况我们以前也出现过,就是污染了.原因有很多:试剂,枪头,水都有可能有问题,建议重新做对照,排查原因.
7楼2012-04-01 09:52:18
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wtyyyyy1988 at 2012-04-01 00:20:22:
空白有带,证明有污染,在重复一次,如果空白没带了,说明是你操作出现问题;如果空白还是有一样的带,试剂有污染了

全都换新的!!
8楼2012-04-01 10:33:07
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wtyyyyy1988

铁杆木虫 (正式写手)

全部换新的,正解!
我就是我
9楼2012-04-01 11:16:09
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hch123

金虫 (正式写手)

额  我最近也是这样 …………………………
脚踏实地:遇一个,学一个,会一个。。。
10楼2012-04-01 12:08:35
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