应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 真菌DNA提取问题
141/2返回列表12下一页
查看: 2351  |  回复: 13
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hxx593847830

新虫 (小有名气)

[求助] 真菌DNA提取问题 已有5人参与

最近在做真菌18S和ITS鉴定，使用液氮研磨、试剂盒提取DNA，已经做了一遍没有跑出条带。因为我是取了2ML菌液，自动研磨10min没有提取出来，猜想可能是提取DNA量少的原因。想问一下各位，试剂盒说是取真菌100mg，真菌菌液培养几天取样较好？取样的话取多少合适？另外，如果我用自动研磨机研磨多长时间好呢？希望有经验的大神指导！！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

真菌

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-09-15 13:24:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

renzhiq

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
hxx593847830: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-09-23 15:47:44
哈哈，你说的这个实验我比较熟悉。我做过，当初我也遇到过同样的问题。解决方法如下；
你可以将生长时间长的菌丝抽滤，用缓冲液漂洗后，在再用液氮碾磨
你也可以将生长短时间（菌体未老化）的菌液离心，用缓冲液漂洗后，再用液氮碾磨
如果这两种方法都不行就改用酶法破壁，效果会比较好。
到由于你是要做菌种鉴定，对基因组的质量要求不高，所以无论那种都可以
在样菌的过程中，切记要保证没有染杂菌
如果还有问题再联系我

发自小木虫Android客户端
赞一下(2人) 回复此楼
9楼2015-09-18 23:47:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

酒家何处

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:12:41
量少的原因的话直接pcr就可以了 。p不出来就不是量少的问题了。可能没有裂解开。自动研磨没用过。提DNA液氮。或者普通研磨，玻璃珠等物理方法应该都差不多。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-09-15 13:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小可爱天

金虫 (小有名气)
为什么用菌液做？菌丝体做应该会有的。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2015-09-15 13:41:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小可爱天

金虫 (小有名气)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:12:48
把你养的菌抽滤，用菌丝体研磨提取做。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-09-15 13:42:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

199006287956

木虫 (著名写手)
真菌细胞壁比较厚，DNA不容易出来，所谓的菌落PCR，只对于一些菌能用。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
追求不惜，奋斗不息
7楼2015-09-17 22:28:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

周宁135139

金虫 (正式写手)
我的菌是PDA培养5天抽滤得到菌体，干燥箱烘干后用组织研磨器磨成粉末，只需30毫克就足够了。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2015-09-18 23:22:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

hxx593847830

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 酒家何处 at 2015-09-15 13:38:42
量少的原因的话直接pcr就可以了 。p不出来就不是量少的问题了。可能没有裂解开。自动研磨没用过。提DNA液氮。或者普通研磨，玻璃珠等物理方法应该都差不多。

谢谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼
5楼2015-09-16 12:41:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hxx593847830

新虫 (小有名气)
谢谢～我想到直接做菌落PCR

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2015-09-16 12:41:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

halfbeer

捐助贵宾 (小有名气)

这是啥？

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by hxx593847830 at 2015-09-16 12:41:45
谢谢～我想到直接做菌落PCR

启动时间长点，我做酵母菌体pcr启动时间15min
赞一下 回复此楼
现在我们能做的就是努力努力再努力
10楼2015-09-24 15:46:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hxx593847830 的主题更新
141/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 调剂 +8 调剂的考研学生 2026-03-09 8/400 2026-03-15 22:14 by Winj1e
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 材料专硕326求调剂 +4 墨煜姒莘 2026-03-15 4/200 2026-03-15 11:02 by dyw
[考研] 一志愿哈工大材料324分求调剂 +5 闫旭东 2026-03-14 5/250 2026-03-14 14:53 by 木瓜膏
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-09 4/200 2026-03-14 02:06 by tranquil_ya
[考研] 0703求调剂 +7 jtyq001 2026-03-10 7/350 2026-03-14 01:06 by JourneyLucky
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:30 by JourneyLucky
[考研] 327求调剂 +4 Ffff03 2026-03-10 4/200 2026-03-14 00:17 by JourneyLucky
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 求材料调剂 +5 隔壁陈先生 2026-03-12 5/250 2026-03-13 22:03 by 星空星月
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-13 3/150 2026-03-13 20:41 by JourneyLucky
[考研] 【考研调剂求收留】 +3 Ceciilia 2026-03-11 3/150 2026-03-13 20:18 by JourneyLucky
[考研] 274求调剂 +3 S.H1 2026-03-12 3/150 2026-03-13 15:15 by JourneyLucky
[考研] 328化工专硕求调剂 +4 。，。，。，。i 2026-03-12 4/200 2026-03-13 14:44 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考研] 296求调剂 +3 大口吃饭 身体健 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:31 by 学员8dgXkO
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[基金申请] 提交后的基金本子，已让学校撤回了，可否换口子提交 +3 dut_pfx 2026-03-10 3/150 2026-03-11 08:38 by kudofaye
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭