| 查看: 2690 | 回复: 13 | |||
hxx593847830新虫 (小有名气)
|
[求助]
真菌DNA提取问题 已有5人参与
|
||
| 最近在做真菌18S和ITS鉴定，使用液氮研磨、试剂盒提取DNA，已经做了一遍没有跑出条带。因为我是取了2ML菌液，自动研磨10min没有提取出来，猜想可能是提取DNA量少的原因。想问一下各位，试剂盒说是取真菌100mg，真菌菌液培养几天取样较好？取样的话取多少合适？另外，如果我用自动研磨机研磨多长时间好呢？希望有经验的大神指导！！ |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 真菌 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有273人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 真菌基因组DNA提取过程中遇到的若干问题
已经有2人回复
- 真菌提取DNA
已经有3人回复
- PCR-DGGE实验中DNA的提取问题
已经有2人回复
- CTAB法提取真菌DNA，得到白色乳胶状透明沉淀，TE不溶。。。。
已经有1人回复
- 真菌菌丝体提取DNA问题
已经有10人回复
- 丝状真菌RNA提取的问题
已经有4人回复
- CTAB法提取真菌DNA的求助
已经有4人回复
- 真菌DNA提取老是被降解掉了，请支招儿
已经有6人回复
- 真菌DNA提取测序的一些问题
已经有5人回复
- DNA提取问题
已经有2人回复
- 真菌提取RNA或DNA问题
已经有9人回复
- 如何提取植物内生真菌总DNA？
已经有2人回复
- 真菌DNA提取完，pcr没有结果怎么办，附基因组DNA电泳图
已经有16人回复
- 求助，大型真菌DNA提取后跑胶只有降解的RNA，无DNA
已经有1人回复
- 土壤DNA提取，真菌通用引物PCR，琼脂糖电泳图，感觉有问题，新手求助
已经有7人回复
- 真菌mtDNA提取问题
已经有3人回复
- 基因组DNA提取问题
已经有32人回复
- 真菌DNA提取问题
已经有2人回复
- 丝状真菌提取总DNA问题
已经有14人回复
- 为什么DNA提取总降解
已经有15人回复
- 崩溃了，土壤DNA提取
已经有20人回复
- 【求助/交流】真菌提取基因组DNA的方法
已经有7人回复
renzhiq
木虫 (小有名气)
- 应助: 56 (初中生)
- 金币: 2106.1
- 红花: 9
- 帖子: 298
- 在线: 53.3小时
- 虫号: 1949303
- 注册: 2012-08-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
hxx593847830: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-09-23 15:47:44
hxx593847830: 金币+10, ★★★很有帮助 2015-09-23 15:47:44
|
哈哈，你说的这个实验我比较熟悉。我做过，当初我也遇到过同样的问题。解决方法如下； 你可以将生长时间长的菌丝抽滤，用缓冲液漂洗后，在再用液氮碾磨 你也可以将生长短时间（菌体未老化）的菌液离心，用缓冲液漂洗后，再用液氮碾磨 如果这两种方法都不行就改用酶法破壁，效果会比较好。 到由于你是要做菌种鉴定，对基因组的质量要求不高，所以无论那种都可以 在样菌的过程中，切记要保证没有染杂菌 如果还有问题再联系我 发自小木虫Android客户端 |
9楼2015-09-18 23:47:51
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:12:41
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:12:41
|
量少的原因的话直接pcr就可以了 。p不出来就不是量少的问题了。可能没有裂解开。自动研磨没用过。提DNA液氮。或者普通研磨，玻璃珠等物理方法应该都差不多。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2015-09-15 13:38:42
3楼2015-09-15 13:41:04
4楼2015-09-15 13:42:03
199006287956
木虫 (著名写手)
- 应助: 44 (小学生)
- 金币: 1662
- 散金: 1884
- 红花: 16
- 帖子: 1430
- 在线: 207.6小时
- 虫号: 2344563
- 注册: 2013-03-13
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
7楼2015-09-17 22:28:35
周宁135139
金虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 3615.6
- 散金: 2012
- 红花: 5
- 帖子: 542
- 在线: 320.8小时
- 虫号: 3908293
- 注册: 2015-06-04
- 专业: 微生物学
8楼2015-09-18 23:22:09
hxx593847830
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 771.4
- 帖子: 73
- 在线: 50.7小时
- 虫号: 2247047
- 注册: 2013-01-17
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
5楼2015-09-16 12:41:23
hxx593847830
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 771.4
- 帖子: 73
- 在线: 50.7小时
- 虫号: 2247047
- 注册: 2013-01-17
- 性别: GG
- 专业: 环境微生物学
6楼2015-09-16 12:41:45
halfbeer
捐助贵宾 (小有名气)
这是啥？
- 应助: 32 (小学生)
- 金币: 2127.3
- 帖子: 285
- 在线: 115小时
- 虫号: 3453688
- 注册: 2014-10-03
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
10楼2015-09-24 15:46:30
20