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yuewen12

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助,大型真菌DNA提取后跑胶只有降解的RNA,无DNA

对灵芝子实体进行DNA提取,取5ul未用RNA酶消化的样品跑胶(胶浓度1.5%),结果显示有降解的RNA但无DNA条带。求各位帮忙分析分析

步骤:

1、液氮研磨样品至粉末状

2、加CTAB,室温温育15min

3、加tris酚、氯仿异戊醇抽提两遍,取上清

4、加氯仿抽提一遍,取上清

5、加异丙醇、醋酸钠沉淀1h,取沉淀

6、75%乙醇洗涤两遍,吹干

7、加ddH2O溶解

目前可以确认CTAB、Tris酚没有问题,提了三次了,中途换了新的tris酚,结果都是这样有降解RNA无DNA,快想死了,求科普,分析!

电泳
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caufarmer

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

CTAB需要65度水浴1小时。
2楼2012-08-10 08:58:59
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