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求助,大型真菌DNA提取后跑胶只有降解的RNA,无DNA
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yuewen12
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(初入文坛)
应助: 1
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帖子: 34
在线: 24小时
虫号: 1332105
注册: 2011-06-27
专业: 食用真菌学
[
求助
]
求助,大型真菌DNA提取后跑胶只有降解的RNA,无DNA
对灵芝子实体进行DNA提取,取5ul未用RNA酶消化的样品跑胶(胶浓度1.5%),结果显示有降解的RNA但无DNA条带。求各位帮忙分析分析
步骤:
1、液氮研磨样品至粉末状
2、加CTAB,室温温育15min
3、加tris酚、氯仿异戊醇抽提两遍,取上清
4、加氯仿抽提一遍,取上清
5、加异丙醇、醋酸钠沉淀1h,取沉淀
6、75%乙醇洗涤两遍,吹干
7、加ddH2O溶解
目前可以确认CTAB、Tris酚没有问题,提了三次了,中途换了新的tris酚,结果都是这样有降解RNA无DNA,快想死了,求科普,分析!
电泳
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【求助/交流】DNA跑胶2ul有目的带很清晰,但是胶回收时,上样量为20ul时跑电泳却降解�
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1楼
2012-08-06 10:44:21
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caufarmer
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虫号: 215252
注册: 2006-03-10
性别: GG
专业: 食用真菌学
【答案】应助回帖
CTAB需要65度水浴1小时。
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2楼
2012-08-10 08:58:59
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