应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 崩溃了，土壤DNA提取
211/3返回列表123下一页
查看: 2771  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yabing0324

金虫 (职业作家)

[求助] 崩溃了，土壤DNA提取

请问做过的同学，提取土壤DNA用什么方法，我做的纠结死了，我看文献报道，用石英砂研磨，SDS提取，酚氯仿异戊醇抽提两次，可是提出来都是深棕色不溶物，电泳可看到条带；

另外一个问题，不同微生物添加量的土样，提出来的浓度是一样的，郁闷啊，所加提取液为1毫升。我个人感觉要么就是研磨不充分，要么就是提取液的用量太少，请各位生物达人多提提意见！谢谢！

我主要是提取土壤中一种真菌的DNA
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

土壤微生物

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-05-09 21:48:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冰鱼儿

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

yabing0324(金币+3): 谢谢 2011-05-11 10:15:41
你的感觉对啊，再改进改进，研磨一定要充分的~不行试剂可以换新的再试试
赞一下 回复此楼
2楼2011-05-09 22:38:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhuqiushi

至尊木虫 (正式写手)

Juventus

【答案】应助回帖

★ ★
yabing0324(金币+3): 好的，下次试一试酶解的方法 2011-05-11 10:16:20
lstt09nk(金币+2): 感谢交流 2011-05-14 09:27:15
上大学做毕设的时候做过一次土壤中总DNA的提取，我没有用石英砂，而是在SDS提取前加的DNA提取液+蛋白酶K，我只做过一次，仅供参考
赞一下(1人) 回复此楼
日子就是问题叠着问题，要挺胸抬头去面对
3楼2011-05-10 08:52:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

farmer009

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
yabing0324(金币+3): 是啊，好的都挺贵！ 2011-05-11 10:16:54
lstt09nk(金币+2): 感谢推荐 2011-05-14 09:27:28
提土壤样品，可以尝试一下用试剂盒，不过就是比较贵奥！我们这用的是进口的PowerMax Soil DNA Isolation Kit，效果还行。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-05-10 09:39:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanying198

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yabing0324(金币+3): 谢谢哦！ 2011-05-11 10:18:11
你可以看看这个网站，也是关于你这个问题的 http://bbs.bbioo.com/thread-50852-1-1.html
赞一下 回复此楼
5楼2011-05-11 08:57:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

spirit-001

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用试剂盒吧 我们这做的 用试剂盒提取的  生工就有  手提的效果不怎么的好
赞一下 回复此楼
6楼2011-05-11 14:14:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhwen182

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

yabing0324(金币+3): 2011-05-11 22:06:47
直接用SDS法提效果还好啊。土壤样品加一定量的水200r/min要30min作用，低转速离心去较大固形物，取上清再高速离心取菌体再提总DNA。最后提的效果还好的。
赞一下 回复此楼
7楼2011-05-11 14:21:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by lhwen182 at 2011-05-11 14:21:45:
直接用SDS法提效果还好啊。土壤样品加一定量的水200r/min要30min作用，低转速离心去较大固形物，取上清再高速离心取菌体再提总DNA。最后提的效果还好的。

嗯，我看有的就是用TENP和PBS进行预处理，或者是磷酸缓冲液，我对您的方法有一个小小的疑问，就是刚开始低速离心的时候，会不会把菌也离下去呢？

请问你做的时候是提的土壤总DNA还是针对其中的细菌或是真菌，我的是真菌，而且这个真菌是以菌核形式存在的，破壁什么的不好整呢、、、
赞一下 回复此楼
8楼2011-05-11 16:00:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhwen182

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 感谢参与 2011-05-14 09:28:00
我做的主要是土壤里的细菌，真菌的差别我不是很清楚。一般低速离心对细菌的影响不是很大，它主要是去固形物小颗粒的。
我提过一次酒曲里的总DNA（主要是细菌），样品合适颜色很深，不过两部抽提后颜色也基本没有了，跑胶效果还好，后面的PCR也可以。
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2011-05-11 19:53:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by lhwen182 at 2011-05-11 19:53:07:
我做的主要是土壤里的细菌，真菌的差别我不是很清楚。一般低速离心对细菌的影响不是很大，它主要是去固形物小颗粒的。
我提过一次酒曲里的总DNA（主要是细菌），样品合适颜色很深，不过两部抽提后颜色也基本没有 ...

真菌细菌的细胞壁成分不一样，我想可能对于破壁的方法会有所区别，非常感谢您的答复！
赞一下 回复此楼
10楼2011-05-11 21:48:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yabing0324 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +3 淇ya_~ 2026-03-17 5/250 2026-03-17 09:25 by Winj1e
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习 +3 Losir 2026-03-12 4/200 2026-03-16 21:52 by Losir
[考研] 286求调剂 +3 lemonzzn 2026-03-16 5/250 2026-03-16 20:43 by lemonzzn
[考研] 一志愿985，本科211，0817化学工程与技术319求调剂 +5 Liwangman 2026-03-15 5/250 2026-03-16 17:10 by 我的船我的海
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +3 大火山小火山 2026-03-16 5/250 2026-03-16 16:54 by barlinike
[考研] 285求调剂 +6 ytter 2026-03-12 6/300 2026-03-16 15:05 by njzyff
[考研] 326求调剂 +4 上岸的小葡 2026-03-15 5/250 2026-03-16 08:39 by Linda Hu
[考研] 327求调剂 +6 拾光任染 2026-03-15 11/550 2026-03-15 22:47 by 拾光任染
[考博] 欢迎申博同学联系 +3 天道酬勤2026686 2026-03-10 7/350 2026-03-15 19:03 by 天道酬勤2026686
[考研] 070305求调剂 +3 mlpqaz03 2026-03-14 4/200 2026-03-15 11:04 by peike
[考研] 中科大材料与化工319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:10 by ms629
[考研] 材料工程专硕，一志愿中国矿业大学，总分314，求调剂 +5 无懈可击的巨人 2026-03-10 5/250 2026-03-14 00:37 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +9 Copy267 2026-03-10 9/450 2026-03-13 23:45 by userper
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中科院，化学方向，295求调剂 +4 一氧二氮 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:35 by JourneyLucky
[考研] 0703化学求调剂 +7 绿豆芹菜汤 2026-03-12 7/350 2026-03-13 17:25 by njzyff
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 一志愿山大07化学 332分 四六级已过 本科山东双非 求调剂！ +3 不想理你 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:18 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂（食品/专硕） +3 xc321 2026-03-12 6/300 2026-03-13 08:45 by xc321
[考研] 研究生招生 +3 徐海涛11 2026-03-10 7/350 2026-03-12 14:26 by 徐海涛11
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭