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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 崩溃了，土壤DNA提取
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lhwen182

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我们这边有人提过酵母，是用蜗牛酶处理的，效果也还行。不知道你的样品里主要是什么，要是其他的类别话就不是很清楚了，建议你在破壁上花点力气。
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11楼2011-05-12 08:41:33
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yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by lhwen182 at 2011-05-12 08:41:33:
我们这边有人提过酵母，是用蜗牛酶处理的，效果也还行。不知道你的样品里主要是什么，要是其他的类别话就不是很清楚了，建议你在破壁上花点力气。

嗯，好的，谢谢，另外提出来杂质好多，溶解不了。
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12楼2011-05-12 10:24:37
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★
lstt09nk(金币+3): 感谢交流，欢迎常来 2011-05-14 09:28:20
“深棕色不溶物”既然不溶解，怎么会“电泳可看到条带”？是不是DNA溶液里有难溶解的杂质？

“不同微生物添加量的土样”是什么意思，你自己加了微生物到土壤里？

“主要是提取土壤中一种真菌的DNA”，照你的方法是能够提取得到的没有专一性的。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
13楼2011-05-12 20:33:09
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怎么都行

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 鼓励推荐 2011-05-14 09:28:36
试剂盒提吧，Bioteke或Omiga的土壤基因组提取试剂盒都不错
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14楼2011-05-13 15:50:37
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yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-05-12 20:33:09:
“深棕色不溶物”既然不溶解，怎么会“电泳可看到条带”？是不是DNA溶液里有难溶解的杂质？

“不同微生物添加量的土样”是什么意思，你自己加了微生物到土壤里？

“主要是提取土壤中一种真菌的DNA”，照你的 ...

深棕色不溶物就是杂质，不知道具体是什么东西，我是洗上清跑电泳，有条带。

不同微生物添加量的图样，是我自己把我自己的菌和土壤按一定比例添加到土壤里。

我是之前添加进去，过一段时间去提取DNA,看定殖情况。
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15楼2011-05-13 19:35:21
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yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by 怎么都行 at 2011-05-13 15:50:37:
试剂盒提吧，Bioteke或Omiga的土壤基因组提取试剂盒都不错

贵哦~~~
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16楼2011-05-13 19:35:51
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yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by spirit-001 at 2011-05-11 14:14:12:
用试剂盒吧 我们这做的 用试剂盒提取的  生工就有  手提的效果不怎么的好

不好意思，我现在还想问下，你做的时候提的是细菌还是真菌呢？我上次用了个百泰克的试用装，不行，今天订了个生工的试用装，期待效果!
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17楼2011-05-23 19:07:20
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yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by farmer009 at 2011-05-10 09:39:43:
提土壤样品，可以尝试一下用试剂盒，不过就是比较贵奥！我们这用的是进口的PowerMax Soil DNA Isolation Kit，效果还行。

我现在也用这个，可还没有提出来，愁死了
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18楼2011-07-05 11:30:03
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farmer009

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by yabing0324 at 2011-07-05 11:30:03:
我现在也用这个，可还没有提出来，愁死了

很可能是你提的过程中某个环节出了差错，例如菌体破碎不充分（不知你是怎么进行破碎的），再就是你的土壤样品不够新鲜，菌群数量低等。如果身边有做相关实验的人，跟他探讨一下，让他分析一下你的整个实验过程。别灰心，认真分析总结一下原因，再试试，实验两三次做出来很正常。继续努力！
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19楼2011-07-05 22:34:20
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yabing0324

金虫 (职业作家)
引用回帖:
Originally posted by farmer009 at 2011-07-05 22:34:20:
很可能是你提的过程中某个环节出了差错，例如菌体破碎不充分（不知你是怎么进行破碎的），再就是你的土壤样品不够新鲜，菌群数量低等。如果身边有做相关实验的人，跟他探讨一下，让他分析一下你的整个实验过程 ...

很谢谢你！我是两个月前采的样，一直放在-80冰箱保存，手提就能提出来，但是用试剂盒一律都是失败，菌体破碎是用试剂盒中配的石榴石震荡破碎，而且还增加了水浴时间和破碎时间。
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20楼2011-07-06 08:48:54
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