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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 自己纯化的蛋白和RNA反应蛋白怎么处理才不使RNA降解
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fxj33102013

新虫 (小有名气)

[求助] 自己纯化的蛋白和RNA反应蛋白怎么处理才不使RNA降解

我的蛋白可以和核糖体结合从而抑制蛋白合成，我要做生化实验。蛋白是过完镍柱后换了三次含DEPC的buffer，然后和裂解液，荧光素酶RNA一起在30度孵育1.5h，去测荧光发现对照买的BSA荧光强度上万，但是我的对照蛋白才100（该蛋白是自己纯化，方法和目的蛋白一样），目的蛋白就十几，说明肯定是我自己纯化的蛋白中含有RNA酶，请问如何才能彻底出去RNA酶呢？之前加过RNA抑制剂，没有多大用。
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Iknowsomeoneintheworldiswaitingforme,althoughI'venoideaofwhoheis.ButIfeelhappyeverydayforthis.
1楼 2015-07-11 15:06:45
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wanglele87

金虫 (著名写手)
你怎么换buffer的？
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一生不羁放纵爱自由
2楼2015-07-13 14:48:32
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fxj33102013

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wanglele87 at 2015-07-13 14:48:32
你怎么换buffer的？

在浓缩管里
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Iknowsomeoneintheworldiswaitingforme,althoughI'venoideaofwhoheis.ButIfeelhappyeverydayforthis.
3楼2015-07-13 20:13:26
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墨之瞳00

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by fxj33102013 at 2015-07-13 20:13:26
在浓缩管里

请问蛋白和RNA孵育的缓冲液体系是什么啊？？我就想看一下我的目的蛋白是不是会降解RNA
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4楼2017-12-08 16:30:31
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lianjiwei
5楼2017-12-08 18:00:06
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