| 查看: 2908 | 回复: 9 | ||
[求助]
大肠杆菌RNA提取测得的OD值一直低于1.8
|
| 如题，请教各位分子生物的专家们，我是食品专业的，没有做过这方面的实验，做了几次提取测得的OD值都是低于1.8，各位能帮忙提点建议可能是什么原因，要怎么解决呢？？多谢多谢啦！！着急呢 |
回复此楼» 猜你喜欢
为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种?
已经有5人回复
-
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》
已经有3人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有297人回复
-
求助 食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社 电子版
已经有5人回复
-
胶体几丁质的结晶度？
已经有0人回复
-
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士
已经有2人回复
-
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
质粒DNA的分离、纯化和鉴定
已经有32人回复- 学科分类求助---医学类
已经有4人回复
- 分子生物学-RNA提取-采用Trizol 溶液提取细菌总RNA （来自云端实验室）
已经有5人回复
- 基因工程课程小结
已经有20人回复
- 蛋白质纯化与鉴定实验指南[l冷泉港]中译本
已经有661人回复
- 翻译 分子生物学
已经有1人回复
- 【资料】分子生物学常见问题解答
已经有30人回复
gywyl1977
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 2590.7
- 红花: 3
- 帖子: 548
- 在线: 41.6小时
- 虫号: 1631149
- 注册: 2012-02-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
2楼2012-07-24 22:30:28
tupac225
金虫 (正式写手)
- MolEPI: 5
- 应助: 103 (高中生)
- 金币: 1967.9
- 散金: 20
- 红花: 4
- 帖子: 460
- 在线: 175.3小时
- 虫号: 1533370
- 注册: 2011-12-11
- 性别: GG
- 专业: 免疫生物学
【答案】应助回帖
★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 很热心，很仔细哦 2012-07-25 14:15:47
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木: 金币+3, 很热心，很仔细哦 2012-07-25 14:15:47
|
还是蛋白的问题，是用什么方法提取的呢？ 蛋白质是污染RNA 样品的又一个重要因素。由于RNase和多酚氧化酶亦属于蛋白质，因而要获得完整的、高质量的RNA 就必须有效地去除蛋白杂质。常规的方法是在冷冻的条件下研磨植物材料以抑制RNase等的活性；提取缓冲液中含有蛋白质变性剂，如苯酚、胍、SDS、十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）等，这样在匀浆时可以使蛋白质变性，凝聚；有的方法是利用蛋白酶K来降解蛋白杂质。进一步可以用苯酚、氯仿抽提去除蛋白质。 Wilcockson利用蛋白质与RNA 在高氯酸钠溶液中的溶解度不同将它们分离。在70%高氯酸钠溶液中，RNA 的溶解度大于蛋白质的溶解度，因而将大部分蛋白质沉淀下来。接着在离心上清液中加入两倍体积的无水乙醇，这时RNA 能沉淀下来而能溶于70%高氯酸钠溶液中的残留蛋白质仍然留在上清液中。这样可以除去绝大部分的蛋白质。 |
3楼2012-07-24 22:34:58
sd3824289
木虫 (正式写手)
- 应助: 47 (小学生)
- 金币: 2304.1
- 散金: 33
- 帖子: 740
- 在线: 105.5小时
- 虫号: 1657712
- 注册: 2012-03-02
- 专业: 生物化学
4楼2012-07-25 10:46:38
5楼2012-07-25 12:35:51
6楼2012-07-25 12:39:08
gywyl1977
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 2590.7
- 红花: 3
- 帖子: 548
- 在线: 41.6小时
- 虫号: 1631149
- 注册: 2012-02-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
7楼2012-07-26 08:20:36
8楼2012-07-26 08:59:02
gywyl1977
木虫 (正式写手)
- MolEPI: 1
- 应助: 72 (初中生)
- 金币: 2590.7
- 红花: 3
- 帖子: 548
- 在线: 41.6小时
- 虫号: 1631149
- 注册: 2012-02-21
- 性别: GG
- 专业: 微生物遗传育种学
9楼2012-07-26 12:14:10
10楼2015-12-02 20:32:52