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butterflyff

新虫 (小有名气)

[求助] 刺激后,RNA水平8h持续3天下调,蛋白在5天之前高表达,而后下调,bug?

细胞刺激后RNA水平8h后持续下调,蛋白在5天之前高表达,7天后开始下调,不知道是否还有意义,如何验证,求各路同门帮忙解答
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oylb

禁言 (正式写手)

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感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-07-20 21:44:32
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2楼2013-07-20 15:47:37
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普通回帖

butterflyff

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by oylb at 2013-07-20 15:47:37
楼主表述得不清楚,让人难以准确理解。是说RNA水平很高,维持8h;到第三天之后开始下降?蛋白质前5天高水平,之后开始下降?如果是这样的话,很简单的解释就是RNA与蛋白质的稳定性差异、蛋白质翻译的时间顺序。

...

非常感谢您的帮助。RNA水平:从八小时开始检测一直到72h都是持续下调,没有上调的情况。而蛋白水平从第一天基本没有差异,到3、5天后显著性上调,再后来7、9天下调;很同意您的解释,我也是遮阳想的,但是想找些文章支持却找不到,不知道您是否有这方面的经验,给出实验方案证明或者类似报道的文献,感激不尽
3楼2013-07-20 16:49:23
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-21 07:50:21
检测RNA的表达量可以用Northern Blotting ;检测RNA的表达量可以用Western Blotting.楼主可以突破的点很多,可以从Protein-DNA interaction入手,也可以从RNA-Protein interaction入手,还可以从蛋白质的翻译后加工,不限于一级结构的加工。

楼主愿意,我们可以继续讨论。
4楼2013-07-20 17:41:08
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-21 07:50:32
我给出楼主具体的实验方案,不相信的话可以看我的论坛个人网页,搜一下我给出别人的具体的实验方案,但是你的题目太大了,你要告诉我你的课题的具体要求,我们可以讨论具体的实验方案。
5楼2013-07-20 17:43:01
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-21 07:50:40
我可以给出楼主具体的实验方案,不相信的话楼主可以看我的论坛个人网页,搜一下我给出别人的具体的实验方案。

但是楼主的题目太大了,楼主要告诉我:你的课题的具体要求(需要保密的细节内容不必提供,这不影响讨论),然后我们可以讨论具体的实验方案。

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6楼2013-07-20 17:44:31
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oylb

禁言 (正式写手)

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gyesang: 金币+3, 有道理! 2013-07-20 21:45:24
butterflyff: 金币+50, 有帮助 2013-10-16 19:41:33
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7楼2013-07-20 19:05:08
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butterflyff

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by oylb at 2013-07-20 19:05:08
首先,根据你的描述,我感觉实验设计的细节不够精确。RNA水平是从8小时到72小时,中间每隔8小时取样?蛋白水平是1、3、5、7、9天检测,每隔两天取样?这个设计就存在问题。RNA在3天(72小时)时下调,那么在5、7、 ...

再次感谢您的帮助。您分析的问题确实存在,应该明确一下后几天RNA水平的变化及8h时的蛋白水平变化。
另外,若精确重复之后,结果可靠,不知道这样的调控结果是否还有意义,因为在体内的话究竟是变化高时起作用,还是变化低时起作用很复杂。根据您的专业,不知道是否遇到过此类表达变化的文章推荐一二,不胜感激
8楼2013-07-20 20:54:05
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butterflyff

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 凌波丽 at 2013-07-20 17:44:31
我可以给出楼主具体的实验方案,不相信的话楼主可以看我的论坛个人网页,搜一下我给出别人的具体的实验方案。

但是楼主的题目太大了,楼主要告诉我:你的课题的具体要求(需要保密的细节内容不必提供,这不影响讨 ...

谢谢您,您有这方面的经验吗,遇到过这类问题的文献吗?
9楼2013-07-20 20:56:07
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-07-21 07:50:51
butterflyff: 金币+10, 有帮助 2013-10-16 19:41:54
引用回帖:
9楼: Originally posted by butterflyff at 2013-07-20 20:56:07
谢谢您,您有这方面的经验吗,遇到过这类问题的文献吗?...

可以看看这篇文献,其中有结果显示ABA处理后RNA水平与蛋白水平变化不一致
Changhyun Yi, Sohyeon Park, Hye Sup Yun, Chian Kwon
Vesicle-associated membrane proteins 721 and 722 are required for unimpeded growth of Arabidopsis under ABA application
Journal of Plant Physiology
Volume 170, Issue 5, 15 March 2013, Pages 529–533

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植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
10楼2013-07-20 23:54:23
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