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fxj33102013

新虫 (小有名气)

[求助] 自己纯化的蛋白和RNA反应蛋白怎么处理才不使RNA降解

我的蛋白可以和核糖体结合从而抑制蛋白合成,我要做生化实验。蛋白是过完镍柱后换了三次含DEPC的buffer,然后和裂解液,荧光素酶RNA一起在30度孵育1.5h,去测荧光发现对照买的BSA荧光强度上万,但是我的对照蛋白才100(该蛋白是自己纯化,方法和目的蛋白一样),目的蛋白就十几,说明肯定是我自己纯化的蛋白中含有RNA酶,请问如何才能彻底出去RNA酶呢?之前加过RNA抑制剂,没有多大用。
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wanglele87

金虫 (著名写手)

你怎么换buffer的?
一生不羁放纵爱自由
2楼2015-07-13 14:48:32
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fxj33102013

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by wanglele87 at 2015-07-13 14:48:32
你怎么换buffer的?

在浓缩管里
Iknowsomeoneintheworldiswaitingforme,althoughI'venoideaofwhoheis.ButIfeelhappyeverydayforthis.
3楼2015-07-13 20:13:26
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墨之瞳00

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by fxj33102013 at 2015-07-13 20:13:26
在浓缩管里

请问蛋白和RNA孵育的缓冲液体系是什么啊??我就想看一下我的目的蛋白是不是会降解RNA
4楼2017-12-08 16:30:31
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5楼2017-12-08 18:00:06
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