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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 动植物 » 综合其他 » 去动物组织时如何防止RNA的降解
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243562850

新虫 (初入文坛)

[交流] 去动物组织时如何防止RNA的降解已有4人参与

我现在有的小鼠的子宫已经放在-80度的冰箱里了，如果拿出来分离内膜的话如何防止RNA的降解呢？用的器械枪头需要什么特殊处理呢？有人说把子宫拿出来再分离内膜RNA就降解的很厉害了所以不够后续的做基因芯片用的了，所以就建议我重新取新鲜组织保存在RNAlater里再运送到公司做基因芯片，麻烦问一下取出来的新鲜标本可以直接放在Trizol里然后再运到外地的公司吗？本人没有什么经验，望高人指导一下，谢谢！

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1楼2011-11-29 10:08:59
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回帖置顶 ( 共有1个 )

wiln1

金虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
jhu132llh(金币+3, APEPI+1): good,鼓励积极应助 2011-12-01 17:46:13
1．经常更换新手套。
2．塑料制品和枪头使用前要用0.1%DEPC水浸泡过夜，后灭菌。玻璃及铁制器皿要在200℃烘箱干烘6-8h。
3．配制溶液应使用无Rnase的水（将水加入干净的试剂瓶中，加DEPC至终浓度0.1%，放置过夜，高压灭菌）。
4．实验前要将超净台台面及移液器用75%酒精棉擦拭灭菌。实验过程中尽量使用无菌镊子操作，尽量避免用手接触
5. 最好用鲜样，冻的样拿出来分离过程中会解冻，这个过程RNA很容易降解。
6. 我觉得你最好自己提取RNA，我不知道动物怎么样，反正我以前送过植物样去公司做，他们提取的效果跟我们自己提取的效果差远了。因为他们不是针对某一种特定材料，而是用通用方法。如果该材料不容易提，我建议还是自己提取。
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微积分2006
6楼2011-11-30 07:48:15
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普通回帖

jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
直接取新鲜组织-80度冻存然后干冰运输去公司应该没问题的
赞一下(1人) 回复此楼
青春的岁月，我们身不由己，只因这胸中燃烧的梦想！
2楼2011-11-29 15:23:53
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243562850

新虫 (初入文坛)
★
jhu132llh(金币+1): good,鼓励新虫积极参加讨论 2011-12-01 17:45:49
取组织用的器械要不要特殊处理呢？我的标本现在在-80的冰箱里，如果拿出来取内膜的话会不会有RNA的降解呢？
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3楼2011-11-29 21:01:36
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cindy1890

铜虫 (小有名气)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
jhu132llh(金币+1): good,鼓励积极应助 2011-12-01 17:45:54
枪头高温灭活RNA酶就好了。注意RNA酶，能够高压蒸汽灭活的都灭活下，效果还不错，祝成功
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4楼2011-11-29 22:09:08
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cindy1890

铜虫 (小有名气)
降解是肯定有的，但是应该不会太多，反转录的话还是没问题的
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5楼2011-11-29 22:10:38
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微积分2006

木虫 (正式写手)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by wiln1 at 2011-11-30 07:48:15:
1．经常更换新手套。
2．塑料制品和枪头使用前要用0.1%DEPC水浸泡过夜，后灭菌。玻璃及铁制器皿要在200℃烘箱干烘6-8h。
3．配制溶液应使用无Rnase的水（将水加入干净的试剂瓶中，加DEPC至终浓度0.1%，放置过夜 ...

学习了
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身未动，心已远
7楼2011-11-30 08:21:38
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243562850

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cindy1890 at 2011-11-29 22:09:08:
枪头高温灭活RNA酶就好了。注意RNA酶，能够高压蒸汽灭活的都灭活下，效果还不错，祝成功

谢谢！
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8楼2011-11-30 10:22:39
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243562850

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wiln1 at 2011-11-30 07:48:15:
1．经常更换新手套。
2．塑料制品和枪头使用前要用0.1%DEPC水浸泡过夜，后灭菌。玻璃及铁制器皿要在200℃烘箱干烘6-8h。
3．配制溶液应使用无Rnase的水（将水加入干净的试剂瓶中，加DEPC至终浓度0.1%，放置过夜 ...

非常感谢您的建议
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9楼2011-11-30 10:25:07
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