24小时热门版块排行榜    

查看: 3273  |  回复: 8
本帖产生 1 个 APEPI ,点击这里进行查看

243562850

新虫 (初入文坛)

[交流] 去动物组织时如何防止RNA的降解 已有4人参与

我现在有的小鼠的子宫已经放在-80度的冰箱里了,如果拿出来分离内膜的话如何防止RNA的降解呢?用的器械枪头需要什么特殊处理呢?有人说把子宫拿出来再分离内膜RNA就降解的很厉害了所以不够后续的做基因芯片用的了,所以就建议我重新取新鲜组织保存在RNAlater里再运送到公司做基因芯片,麻烦问一下取出来的新鲜标本可以直接放在Trizol里然后再运到外地的公司吗?本人没有什么经验,望高人指导一下,谢谢!

[ 来自科研家族 快乐检索 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jhu132llh

荣誉版主 (知名作家)

大洪


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
直接取新鲜组织-80度冻存然后干冰运输去公司应该没问题的
青春的岁月,我们身不由己,只因这胸中燃烧的梦想!
2楼2011-11-29 15:23:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

243562850

新虫 (初入文坛)


jhu132llh(金币+1): good,鼓励新虫积极参加讨论 2011-12-01 17:45:49
取组织用的器械要不要特殊处理呢?我的标本现在在-80的冰箱里,如果拿出来取内膜的话会不会有RNA的降解呢?
3楼2011-11-29 21:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cindy1890

铜虫 (小有名气)

★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
jhu132llh(金币+1): good,鼓励积极应助 2011-12-01 17:45:54
枪头高温灭活RNA酶就好了。注意RNA酶,能够高压蒸汽灭活的都灭活下,效果还不错,祝成功
4楼2011-11-29 22:09:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cindy1890

铜虫 (小有名气)

降解是肯定有的,但是应该不会太多,反转录的话还是没问题的
5楼2011-11-29 22:10:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wiln1

金虫 (小有名气)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
jhu132llh(金币+3, APEPI+1): good,鼓励积极应助 2011-12-01 17:46:13
1.经常更换新手套。
2.塑料制品和枪头使用前要用0.1%DEPC水浸泡过夜,后灭菌。玻璃及铁制器皿要在200℃烘箱干烘6-8h。
3.配制溶液应使用无Rnase的水(将水加入干净的试剂瓶中,加DEPC至终浓度0.1%,放置过夜,高压灭菌)。
4.实验前要将超净台台面及移液器用75%酒精棉擦拭灭菌。实验过程中尽量使用无菌镊子操作,尽量避免用手接触
5. 最好用鲜样,冻的样拿出来分离过程中会解冻,这个过程RNA很容易降解。
6. 我觉得你最好自己提取RNA,我不知道动物怎么样,反正我以前送过植物样去公司做,他们提取的效果跟我们自己提取的效果差远了。因为他们不是针对某一种特定材料,而是用通用方法。如果该材料不容易提,我建议还是自己提取。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

6楼2011-11-30 07:48:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微积分2006

木虫 (正式写手)

送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by wiln1 at 2011-11-30 07:48:15:
1.经常更换新手套。
2.塑料制品和枪头使用前要用0.1%DEPC水浸泡过夜,后灭菌。玻璃及铁制器皿要在200℃烘箱干烘6-8h。
3.配制溶液应使用无Rnase的水(将水加入干净的试剂瓶中,加DEPC至终浓度0.1%,放置过夜 ...

学习了
身未动,心已远
7楼2011-11-30 08:21:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

243562850

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by cindy1890 at 2011-11-29 22:09:08:
枪头高温灭活RNA酶就好了。注意RNA酶,能够高压蒸汽灭活的都灭活下,效果还不错,祝成功

谢谢!
8楼2011-11-30 10:22:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

243562850

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wiln1 at 2011-11-30 07:48:15:
1.经常更换新手套。
2.塑料制品和枪头使用前要用0.1%DEPC水浸泡过夜,后灭菌。玻璃及铁制器皿要在200℃烘箱干烘6-8h。
3.配制溶液应使用无Rnase的水(将水加入干净的试剂瓶中,加DEPC至终浓度0.1%,放置过夜 ...

非常感谢您的建议
9楼2011-11-30 10:25:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 243562850 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 +6 晴天加油 2026-08-26 7/350 2026-08-27 07:30 by pinghe007
[基金申请] 看板上这么多中的,有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +3 a089 2026-08-26 3/150 2026-08-26 23:21 by young90
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 系统查不到 +10 董八千 2026-08-26 10/500 2026-08-26 16:30 by Equinoxhua
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +9 炎黄贵胄 2026-08-22 10/500 2026-08-26 15:40 by semaglutide
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +22 羊腰板 2026-08-21 25/1250 2026-08-26 15:00 by zuocuiping
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件,有关系吗? +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +4 yuleib84 2026-08-26 5/250 2026-08-26 13:40 by yuleib84
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 科研孤儿太难了 +21 我4大白菜 2026-08-20 22/1100 2026-08-26 11:29 by nlgza
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 让我中一个面上吧! +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见