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wangweijian

金虫 (小有名气)

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[求助] 荧光PCR阴性对照跑电泳有条带

我做的是Taqman 荧光定量PCR，假阳性很严重，阴性对照加水作为模板，Ct值30左右，有时30以内，跑琼脂糖凝胶电泳有淡淡的条带，能明显看出来，求各位分析下原因及采取何种对策才能消除假阳性？我自己也琢磨了些原因，请各位看看对不对。

1.引物、探针的特异性不好，换引物探针；

2.调整PCR反应体系，如减少酶的用量、Mg离子浓度，降低PCR扩增效率，但是会付出降低灵敏度的代价；

3.系统性的对PCR环境进行政治，这点不知大家有何良策？

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1楼2015-07-04 11:11:43

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智能机器人

Robot (super robot)

我们都爱小木虫

找到一些相关的精华帖子，希望有用哦~

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