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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 测序结果不一致
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hutil1543

金虫 (小有名气)

[求助] 测序结果不一致 已有3人参与

600bp的产物（rpob基因）条带单一明亮，用宝生物t载体做的连接，转化以后大概几十个单克隆，挑了3个单克隆以后摇菌提质粒，3个单克隆序列各有1、2个碱基的差异，看测序图没有误读，这种情况出现好多次了，可能是什么原因。
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1楼 2015-06-30 08:46:13
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR呗，但是话又说回来，600bp突变概率应该是很小的
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科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
4楼2015-06-30 18:43:05
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菁菁很蛋疼

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR过程中突变了，你用的什么酶？
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2楼2015-06-30 09:47:47
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591703919

木虫 (小有名气)
测序结果用个别碱基不同挺常见的
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穷则独善其身达则兼济天下
3楼2015-06-30 10:39:31
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haloarchaeon

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

查查相近菌株的基因组的rpob基因是否有异源性
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haloarchaeon
5楼2015-07-04 21:44:58
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