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测序结果不一致
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hutil1543
金虫
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专业: 微生物资源与分类学
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测序结果不一致
已有3人参与
600bp的产物(rpob基因)条带单一明亮,用宝生物t载体做的连接,转化以后大概几十个单克隆,挑了3个单克隆以后摇菌提质粒,3个单克隆序列各有1、2个碱基的差异,看测序图没有误读,这种情况出现好多次了,可能是什么原因。
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【求助/交流】核基因 PCR产物直接测序,结果出现单个位点套峰,是否需要做克隆测序
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1楼
2015-06-30 08:46:13
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菁菁很蛋疼
新虫
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虫号: 3119668
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专业: 生物信息学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
PCR过程中突变了,你用的什么酶?
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2楼
2015-06-30 09:47:47
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591703919
木虫
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在线: 90.2小时
虫号: 1657703
注册: 2012-03-02
性别: GG
专业: 环境工程
测序结果用个别碱基不同挺常见的
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穷则独善其身达则兼济天下
3楼
2015-06-30 10:39:31
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dehong1573
至尊木虫
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性别: GG
专业: 病原细菌与放线菌生物学
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
PCR呗,但是话又说回来,600bp突变概率应该是很小的
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科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
4楼
2015-06-30 18:43:05
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haloarchaeon
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注册: 2010-02-09
性别: GG
专业: 微生物资源与分类学
【答案】应助回帖
查查相近菌株的基因组的rpob基因是否有异源性
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haloarchaeon
5楼
2015-07-04 21:44:58
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