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火舞精灵3

铜虫 (正式写手)

[求助] 求解pETDUET-1 原核共表达两个基因一些不懂的地方已有3人参与

有两个通过pulldown、酵母双杂验证过的两个互作蛋白,现在想在大肠杆菌中共表达这两个蛋白,
第一个问题:是在一个质粒中表达这两个蛋白好(pETDuet-1),还是分别在两个质粒中表达好(pETDuet-1/pACYCDuet-1)?
第二个问题:假设在一个pETDuet-1共表达两个基因,而只有一个His标签(载体截图在下面),会不会因为结合力弱而只得到一个蛋白(与His直接相连的蛋白与Ni柱结合)另一个蛋白直接就是穿出,得不到互作蛋白啊?
PS: pulldown可以把这两个蛋白拉出来,那His纯化可以依靠结合力拉出来吗?

求解pETDUET-1 原核共表达两个基因一些不懂的地方
图片1.jpg
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冰城'若雪

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 1993云崖 at 2015-10-08 23:35:58
我有
...

你好,请问你能寄一点质粒给我?邮费我出

发自小木虫Android客户端
8楼2015-12-09 11:33:51
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


【答案】应助回帖

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
感谢参与,应助指数 +1
另外一个没有his标签的蛋白,你可以设计引物的时候加上去
2楼2015-06-17 12:40:55
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墨城

木虫 (正式写手)

请问你有pACYCDuet-1 质粒吗
3楼2015-08-11 20:15:53
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火舞精灵3

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 墨城 at 2015-08-11 20:15:53
请问你有pACYCDuet-1 质粒吗

MEIYOU
翻新核弹头,回收二手航母,大修核反应堆,航天飞机保养换三滤,高空作业擦洗卫星表面积尘,南极冰川修复,提供原子对撞机,提供捕捉反物质原子技术支持
4楼2015-08-11 22:23:14
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